通过改良EDC法,将2,4-DB、2,4-D分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联合成了2,4-D的免疫原2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA和包被原2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA.免疫抗原测定结果表明,所得紫外吸收光谱,具有载体蛋白BSA和半抗原2,4-DB或2,4-D的特性,最大吸收峰为282 nm.合成2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA免疫抗原的结合比分别为1:24、1:20,合成的2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA包被原的结合比分别为1:10、1:8.上述两种免疫原分别免疫新西兰白雄兔,获得2,4-D类农药多克隆抗体.其中免疫2,4-DB-BSA的两只兔PBD1和PBD2的效价较高,分别是1:102400和1:51 200.选择效价较高的PBD1多克隆抗体进一步优化筛选出抗原抗体的工作浓度,2,4-D-OVA包被原3 μg·mL-1,PBD1多克隆抗体1:12 800.经测定,该多克隆抗体对目标检测物2,4-D、2,4-D butyl ester敏感度较高,抑制中浓度(I,50)、检测限(I,20)分别为,2,4-D:179.8 ng·mL-1,1.09 ng·mL-1;2,4-D butyl ester:3010.0 ng·mL-1,1.53 ng·mL-1.对2,4-D识别的特异性也较强.另外测定了制备2,4-D多克隆抗体对几种2,4-D类似结构化合物交叉特异性反应,2,4-DB最强,2,4-D次之,之后依次为2,4-D丁酯、2,4-D异丙酯,交叉反应性较差的有2甲4氯、2,4,5-涕、2,4-滴丙酸.
通過改良EDC法,將2,4-DB、2,4-D分彆與載體蛋白(BSA、OVA)偶聯閤成瞭2,4-D的免疫原2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA和包被原2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA.免疫抗原測定結果錶明,所得紫外吸收光譜,具有載體蛋白BSA和半抗原2,4-DB或2,4-D的特性,最大吸收峰為282 nm.閤成2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA免疫抗原的結閤比分彆為1:24、1:20,閤成的2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA包被原的結閤比分彆為1:10、1:8.上述兩種免疫原分彆免疫新西蘭白雄兔,穫得2,4-D類農藥多剋隆抗體.其中免疫2,4-DB-BSA的兩隻兔PBD1和PBD2的效價較高,分彆是1:102400和1:51 200.選擇效價較高的PBD1多剋隆抗體進一步優化篩選齣抗原抗體的工作濃度,2,4-D-OVA包被原3 μg·mL-1,PBD1多剋隆抗體1:12 800.經測定,該多剋隆抗體對目標檢測物2,4-D、2,4-D butyl ester敏感度較高,抑製中濃度(I,50)、檢測限(I,20)分彆為,2,4-D:179.8 ng·mL-1,1.09 ng·mL-1;2,4-D butyl ester:3010.0 ng·mL-1,1.53 ng·mL-1.對2,4-D識彆的特異性也較彊.另外測定瞭製備2,4-D多剋隆抗體對幾種2,4-D類似結構化閤物交扠特異性反應,2,4-DB最彊,2,4-D次之,之後依次為2,4-D丁酯、2,4-D異丙酯,交扠反應性較差的有2甲4氯、2,4,5-涕、2,4-滴丙痠.
통과개량EDC법,장2,4-DB、2,4-D분별여재체단백(BSA、OVA)우연합성료2,4-D적면역원2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA화포피원2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA.면역항원측정결과표명,소득자외흡수광보,구유재체단백BSA화반항원2,4-DB혹2,4-D적특성,최대흡수봉위282 nm.합성2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA면역항원적결합비분별위1:24、1:20,합성적2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA포피원적결합비분별위1:10、1:8.상술량충면역원분별면역신서란백웅토,획득2,4-D류농약다극륭항체.기중면역2,4-DB-BSA적량지토PBD1화PBD2적효개교고,분별시1:102400화1:51 200.선택효개교고적PBD1다극륭항체진일보우화사선출항원항체적공작농도,2,4-D-OVA포피원3 μg·mL-1,PBD1다극륭항체1:12 800.경측정,해다극륭항체대목표검측물2,4-D、2,4-D butyl ester민감도교고,억제중농도(I,50)、검측한(I,20)분별위,2,4-D:179.8 ng·mL-1,1.09 ng·mL-1;2,4-D butyl ester:3010.0 ng·mL-1,1.53 ng·mL-1.대2,4-D식별적특이성야교강.령외측정료제비2,4-D다극륭항체대궤충2,4-D유사결구화합물교차특이성반응,2,4-DB최강,2,4-D차지,지후의차위2,4-D정지、2,4-D이병지,교차반응성교차적유2갑4록、2,4,5-체、2,4-적병산.
