中国眼耳鼻喉科杂志
中國眼耳鼻喉科雜誌
중국안이비후과잡지
CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY AND OTOLARYNGOLOGY
2009年
1期
20-22,附3
,共4页
章德广%王正敏%徐江红%陈兵%戴文佳%李忠明
章德廣%王正敏%徐江紅%陳兵%戴文佳%李忠明
장덕엄%왕정민%서강홍%진병%대문가%리충명
中耳炎%链球菌,肺炎%疫苗%肺炎球菌菌苗
中耳炎%鏈毬菌,肺炎%疫苗%肺炎毬菌菌苗
중이염%련구균,폐염%역묘%폐염구균균묘
目的 应用基因工程技术制备肺炎链球菌表面黏附素A(pneumococcal surface adhesin A.PsaA),并分析其抗原性.方法 根据基因库中报道的psaA基因序列,从肺炎链球菌基因组中扩增出psaA基因,连接到原核表达载体pET28a中,构建出重组质粒pET28a-psaA,转化大肠杆菌BL21(DE3),采用镍柱亲和层析法纯化PsaA蛋白,Western-blot分析其抗原性.结果 克隆出的psaA基因同基因库中报道的psaA基因序列一致.成功构建出重组质粒pET28a-psaA,基因测序证实重组质粒构建正确.成功表达和纯化出PsaA蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示蛋白分子量为37.kDa,最终得到纯度较高的蛋白,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析显示在37-kDa处见到目的 蛋白条带.结论 利用基因工程技术可以克隆出psaA基因,并成功表达和纯化出PsaA蛋白,其抗原性良好.(中国眼耳鼻喉科杂志,2009,9:20-22)
目的 應用基因工程技術製備肺炎鏈毬菌錶麵黏附素A(pneumococcal surface adhesin A.PsaA),併分析其抗原性.方法 根據基因庫中報道的psaA基因序列,從肺炎鏈毬菌基因組中擴增齣psaA基因,連接到原覈錶達載體pET28a中,構建齣重組質粒pET28a-psaA,轉化大腸桿菌BL21(DE3),採用鎳柱親和層析法純化PsaA蛋白,Western-blot分析其抗原性.結果 剋隆齣的psaA基因同基因庫中報道的psaA基因序列一緻.成功構建齣重組質粒pET28a-psaA,基因測序證實重組質粒構建正確.成功錶達和純化齣PsaA蛋白,十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示蛋白分子量為37.kDa,最終得到純度較高的蛋白,主要以可溶性形式存在,Western-blot分析顯示在37-kDa處見到目的 蛋白條帶.結論 利用基因工程技術可以剋隆齣psaA基因,併成功錶達和純化齣PsaA蛋白,其抗原性良好.(中國眼耳鼻喉科雜誌,2009,9:20-22)
목적 응용기인공정기술제비폐염련구균표면점부소A(pneumococcal surface adhesin A.PsaA),병분석기항원성.방법 근거기인고중보도적psaA기인서렬,종폐염련구균기인조중확증출psaA기인,련접도원핵표체재체pET28a중,구건출중조질립pET28a-psaA,전화대장간균BL21(DE3),채용얼주친화층석법순화PsaA단백,Western-blot분석기항원성.결과 극륭출적psaA기인동기인고중보도적psaA기인서렬일치.성공구건출중조질립pET28a-psaA,기인측서증실중조질립구건정학.성공표체화순화출PsaA단백,십이완기류산납-취병희선알응효전영현시단백분자량위37.kDa,최종득도순도교고적단백,주요이가용성형식존재,Western-blot분석현시재37-kDa처견도목적 단백조대.결론 이용기인공정기술가이극륭출psaA기인,병성공표체화순화출PsaA단백,기항원성량호.(중국안이비후과잡지,2009,9:20-22)
