四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2010年
5期
1159-1164
,共6页
闫雯琦%李珉%李星洁%康耀霞%康晋梅%张义正
閆雯琦%李珉%李星潔%康耀霞%康晉梅%張義正
염문기%리민%리성길%강요하%강진매%장의정
小鼠%高胆固醇血症%辛伐他汀%肝脏%基因表达
小鼠%高膽固醇血癥%辛伐他汀%肝髒%基因錶達
소서%고담고순혈증%신벌타정%간장%기인표체
为了研究辛伐他汀治疗高胆固醇血症过程中肝脏的差异表达基因,我们利用抑制消减杂交(SSH)技术构建了高胆固醇血症小鼠及高胆固醇血症经辛伐他汀治疗小鼠的肝脏双向差异表达基因文库,并采用改进的negative subtraction chain(NSC)方法去除正向文库的绝大部分假阳性背景,使得SSH文库的容量缩小了近50倍,对筛选到14个差异表达克隆再经过斑点杂交验证,最终获得8个阳性克隆.经DNA序列测定和基因功能分析,结果表明,辛伐他汀治疗高胆固醇血症过程中,小鼠肝脏差异表达的已知功能基因主要有以下几类:脂类代谢基因、炎性免疫反应相关基因、细胞粘附基因、逆境胁迫基因.改进的NSC和SSH技术的结合使用,大大地增加了差异表达基因文库的阳性率,提高了获得差异表达基因的效率.
為瞭研究辛伐他汀治療高膽固醇血癥過程中肝髒的差異錶達基因,我們利用抑製消減雜交(SSH)技術構建瞭高膽固醇血癥小鼠及高膽固醇血癥經辛伐他汀治療小鼠的肝髒雙嚮差異錶達基因文庫,併採用改進的negative subtraction chain(NSC)方法去除正嚮文庫的絕大部分假暘性揹景,使得SSH文庫的容量縮小瞭近50倍,對篩選到14箇差異錶達剋隆再經過斑點雜交驗證,最終穫得8箇暘性剋隆.經DNA序列測定和基因功能分析,結果錶明,辛伐他汀治療高膽固醇血癥過程中,小鼠肝髒差異錶達的已知功能基因主要有以下幾類:脂類代謝基因、炎性免疫反應相關基因、細胞粘附基因、逆境脅迫基因.改進的NSC和SSH技術的結閤使用,大大地增加瞭差異錶達基因文庫的暘性率,提高瞭穫得差異錶達基因的效率.
위료연구신벌타정치료고담고순혈증과정중간장적차이표체기인,아문이용억제소감잡교(SSH)기술구건료고담고순혈증소서급고담고순혈증경신벌타정치료소서적간장쌍향차이표체기인문고,병채용개진적negative subtraction chain(NSC)방법거제정향문고적절대부분가양성배경,사득SSH문고적용량축소료근50배,대사선도14개차이표체극륭재경과반점잡교험증,최종획득8개양성극륭.경DNA서렬측정화기인공능분석,결과표명,신벌타정치료고담고순혈증과정중,소서간장차이표체적이지공능기인주요유이하궤류:지류대사기인、염성면역반응상관기인、세포점부기인、역경협박기인.개진적NSC화SSH기술적결합사용,대대지증가료차이표체기인문고적양성솔,제고료획득차이표체기인적효솔.
