广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
12期
128-130
,共3页
烟草花叶病毒%复制酶基因%抗病毒%转基因烟草%农杆菌转化
煙草花葉病毒%複製酶基因%抗病毒%轉基因煙草%農桿菌轉化
연초화협병독%복제매기인%항병독%전기인연초%농간균전화
将烟草花叶病毒复制酶54 KD蛋白基因构建到质粒pSSZ32.54K,导入根癌农杆菌EHA105株系,用农杆菌介导的叶盘法转化含CMV CP基因的纯合系烟草,获得了含CMV CP基因和TMV RepE基因的转基因烟草,以及只含TMV RepE基因的转基因烟草.以繁殖于新鲜普通烟叶片上的TMV为毒源,机械摩擦接种含双基因的烟草和只含CMV CP基因的烟草.接种15 d后,观察植株发病情况,发现转双基因的烟草无花叶症状出现,而对照植株(只含CMV CP基因)出现花叶症状.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病毒含量,发现转基因植株体内无病毒积累,而对照植株体内有病毒积累.因此,含RepE基因的烟草对TMV有一定抗性.
將煙草花葉病毒複製酶54 KD蛋白基因構建到質粒pSSZ32.54K,導入根癌農桿菌EHA105株繫,用農桿菌介導的葉盤法轉化含CMV CP基因的純閤繫煙草,穫得瞭含CMV CP基因和TMV RepE基因的轉基因煙草,以及隻含TMV RepE基因的轉基因煙草.以繁殖于新鮮普通煙葉片上的TMV為毒源,機械摩抆接種含雙基因的煙草和隻含CMV CP基因的煙草.接種15 d後,觀察植株髮病情況,髮現轉雙基因的煙草無花葉癥狀齣現,而對照植株(隻含CMV CP基因)齣現花葉癥狀.通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測病毒含量,髮現轉基因植株體內無病毒積纍,而對照植株體內有病毒積纍.因此,含RepE基因的煙草對TMV有一定抗性.
장연초화협병독복제매54 KD단백기인구건도질립pSSZ32.54K,도입근암농간균EHA105주계,용농간균개도적협반법전화함CMV CP기인적순합계연초,획득료함CMV CP기인화TMV RepE기인적전기인연초,이급지함TMV RepE기인적전기인연초.이번식우신선보통연협편상적TMV위독원,궤계마찰접충함쌍기인적연초화지함CMV CP기인적연초.접충15 d후,관찰식주발병정황,발현전쌍기인적연초무화협증상출현,이대조식주(지함CMV CP기인)출현화협증상.통과매련면역흡부시험(ELISA)검측병독함량,발현전기인식주체내무병독적루,이대조식주체내유병독적루.인차,함RepE기인적연초대TMV유일정항성.
