河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2011年
5期
59-62,68
,共5页
卢艳敏%崔海信%王承民%何宏轩
盧豔敏%崔海信%王承民%何宏軒
로염민%최해신%왕승민%하굉헌
MagaininⅡ%抗菌肽%融合表达%抑菌活性
MagaininⅡ%抗菌肽%融閤錶達%抑菌活性
MagaininⅡ%항균태%융합표체%억균활성
根据MagaininⅡ氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,化学合成了2个DNA片段,利用重叠区互补PCR法得到MagaininⅡ的基因序列.构建了融合表达载体pET21 b-MagaininⅡ,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,在5.1 kD处可见目的蛋白条带,经Western blot检测表明成功地在大肠杆菌中表达了融合蛋白.诱导温度在20℃,IPTG终浓度为0.4 mmol/L,诱导时间为12 h,融合蛋白表达效果较好,且主要以可溶性形式存在,对纯化得到的融合蛋白进行活性分析,抑菌活性试验表明,表达产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用.
根據MagaininⅡ氨基痠序列,選用大腸桿菌偏愛密碼子,化學閤成瞭2箇DNA片段,利用重疊區互補PCR法得到MagaininⅡ的基因序列.構建瞭融閤錶達載體pET21 b-MagaininⅡ,轉化大腸桿菌BL21(DE3)pLysS,IPTG誘導錶達,錶達產物經SDS-PAGE分析,在5.1 kD處可見目的蛋白條帶,經Western blot檢測錶明成功地在大腸桿菌中錶達瞭融閤蛋白.誘導溫度在20℃,IPTG終濃度為0.4 mmol/L,誘導時間為12 h,融閤蛋白錶達效果較好,且主要以可溶性形式存在,對純化得到的融閤蛋白進行活性分析,抑菌活性試驗錶明,錶達產物對大腸桿菌和金黃色葡萄毬菌均有抑製作用.
근거MagaininⅡ안기산서렬,선용대장간균편애밀마자,화학합성료2개DNA편단,이용중첩구호보PCR법득도MagaininⅡ적기인서렬.구건료융합표체재체pET21 b-MagaininⅡ,전화대장간균BL21(DE3)pLysS,IPTG유도표체,표체산물경SDS-PAGE분석,재5.1 kD처가견목적단백조대,경Western blot검측표명성공지재대장간균중표체료융합단백.유도온도재20℃,IPTG종농도위0.4 mmol/L,유도시간위12 h,융합단백표체효과교호,차주요이가용성형식존재,대순화득도적융합단백진행활성분석,억균활성시험표명,표체산물대대장간균화금황색포도구균균유억제작용.
