中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
中華耳鼻嚥喉頭頸外科雜誌
중화이비인후두경외과잡지
CHINESE JOURNAL OF OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY
2007年
1期
42-47
,共6页
江红群%王正敏%沈云珍%李雯
江紅群%王正敏%瀋雲珍%李雯
강홍군%왕정민%침운진%리문
毛细胞%耳蜗%细胞培养%成纤维细胞生长因子,碱性%表皮生长因子
毛細胞%耳蝸%細胞培養%成纖維細胞生長因子,堿性%錶皮生長因子
모세포%이와%세포배양%성섬유세포생장인자,감성%표피생장인자
目的 研究新生大鼠耳蜗内是否存在增殖细胞,以及该增殖细胞能分化为何种细胞.方法 分离新生SD大鼠耳蜗细胞并进行培养,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)检测细胞的增殖状态,通过免疫荧光鉴定细胞球及分化细胞的性质.分离48个耳蜗Corti器,采用数字表格法随机分成4组进行细胞培养:对照组、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)组、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)组和EGF+bFGF组,每组12个,定量计数单个耳蜗培养细胞球的数量,结果进行方差分析.采用透射和扫描电镜观察细胞球的超微结构.结果 耳蜗Corti器细胞培养可见细胞球形成,90.1%球内细胞BrdU表达阳性,且大部分细胞巢蛋白表达阳性.分化细胞表达毛细胞标志物肌球蛋白7A、espin及鬼笔环肽阳性,神经元标志物神经丝蛋白(neurofilament M,NF-M)表达阳性,并且可见肌球蛋白7A和BrdU,espin和BrdU,以及NF-M和BedU双标阳性的分化细胞.对照组平均((-x)±s,以下同)每个耳蜗Corti器的增殖细胞数量为(45.3±23.0)个,EGF组(86.2±34.1)个,bFGF组(96.5±33.6)个,EGF+bFGF组(131.2±47.0)个.除EGF组和bFGF组之间P＞0.05外,其余各组之间P值均＜0.05,差异具有统计学意义.扫描和透射电镜下细胞球内细胞呈圆球形,大小均匀一致,表面具有众多微绒毛.胞质内有丰富的内质网、微管、微丝和线粒体等细胞骨架结构和细胞器,相邻细胞之间可见紧密连接、桥粒与缝隙连接.结论 大鼠耳蜗内存在增殖细胞,可分化为具有纤毛样结构的毛细胞及神经元.EGF和bFGF均可诱导增殖细胞分裂增殖.该增殖细胞的超微结构显示其具有早期幼稚细胞发育的特征.
目的 研究新生大鼠耳蝸內是否存在增殖細胞,以及該增殖細胞能分化為何種細胞.方法 分離新生SD大鼠耳蝸細胞併進行培養,加入5-溴-2-脫氧尿嘧啶(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)檢測細胞的增殖狀態,通過免疫熒光鑒定細胞毬及分化細胞的性質.分離48箇耳蝸Corti器,採用數字錶格法隨機分成4組進行細胞培養:對照組、錶皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)組、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)組和EGF+bFGF組,每組12箇,定量計數單箇耳蝸培養細胞毬的數量,結果進行方差分析.採用透射和掃描電鏡觀察細胞毬的超微結構.結果 耳蝸Corti器細胞培養可見細胞毬形成,90.1%毬內細胞BrdU錶達暘性,且大部分細胞巢蛋白錶達暘性.分化細胞錶達毛細胞標誌物肌毬蛋白7A、espin及鬼筆環肽暘性,神經元標誌物神經絲蛋白(neurofilament M,NF-M)錶達暘性,併且可見肌毬蛋白7A和BrdU,espin和BrdU,以及NF-M和BedU雙標暘性的分化細胞.對照組平均((-x)±s,以下同)每箇耳蝸Corti器的增殖細胞數量為(45.3±23.0)箇,EGF組(86.2±34.1)箇,bFGF組(96.5±33.6)箇,EGF+bFGF組(131.2±47.0)箇.除EGF組和bFGF組之間P＞0.05外,其餘各組之間P值均＜0.05,差異具有統計學意義.掃描和透射電鏡下細胞毬內細胞呈圓毬形,大小均勻一緻,錶麵具有衆多微絨毛.胞質內有豐富的內質網、微管、微絲和線粒體等細胞骨架結構和細胞器,相鄰細胞之間可見緊密連接、橋粒與縫隙連接.結論 大鼠耳蝸內存在增殖細胞,可分化為具有纖毛樣結構的毛細胞及神經元.EGF和bFGF均可誘導增殖細胞分裂增殖.該增殖細胞的超微結構顯示其具有早期幼稚細胞髮育的特徵.
목적 연구신생대서이와내시부존재증식세포,이급해증식세포능분화위하충세포.방법 분리신생SD대서이와세포병진행배양,가입5-추-2-탈양뇨밀정(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)검측세포적증식상태,통과면역형광감정세포구급분화세포적성질.분리48개이와Corti기,채용수자표격법수궤분성4조진행세포배양:대조조、표피생장인자(epidermal growth factor,EGF)조、감성성섬유세포생장인자(basic fibroblast growth factor,bFGF)조화EGF+bFGF조,매조12개,정량계수단개이와배양세포구적수량,결과진행방차분석.채용투사화소묘전경관찰세포구적초미결구.결과 이와Corti기세포배양가견세포구형성,90.1%구내세포BrdU표체양성,차대부분세포소단백표체양성.분화세포표체모세포표지물기구단백7A、espin급귀필배태양성,신경원표지물신경사단백(neurofilament M,NF-M)표체양성,병차가견기구단백7A화BrdU,espin화BrdU,이급NF-M화BedU쌍표양성적분화세포.대조조평균((-x)±s,이하동)매개이와Corti기적증식세포수량위(45.3±23.0)개,EGF조(86.2±34.1)개,bFGF조(96.5±33.6)개,EGF+bFGF조(131.2±47.0)개.제EGF조화bFGF조지간P＞0.05외,기여각조지간P치균＜0.05,차이구유통계학의의.소묘화투사전경하세포구내세포정원구형,대소균균일치,표면구유음다미융모.포질내유봉부적내질망、미관、미사화선립체등세포골가결구화세포기,상린세포지간가견긴밀련접、교립여봉극련접.결론 대서이와내존재증식세포,가분화위구유섬모양결구적모세포급신경원.EGF화bFGF균가유도증식세포분렬증식.해증식세포적초미결구현시기구유조기유치세포발육적특정.
