中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
10期
871-877
,共7页
韩毓%汪晓莺%季玉红%沈爱国%孙晓雷%胡迎青%周晓荣%吴琼
韓毓%汪曉鶯%季玉紅%瀋愛國%孫曉雷%鬍迎青%週曉榮%吳瓊
한육%왕효앵%계옥홍%침애국%손효뢰%호영청%주효영%오경
β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ%CD4+辅助性T细胞%细胞黏附
β-1,4-半乳糖基轉移酶Ⅰ%CD4+輔助性T細胞%細胞黏附
β-1,4-반유당기전이매Ⅰ%CD4+보조성T세포%세포점부
目的 研究β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferaseⅠ,β-1,4-GalT Ⅰ)在CD4+TH中的表达与定位以及β-1,4-GalTⅠ对CD4+ TH细胞黏附能力的影响.方法 采用免疫磁珠阳性分选法分离纯化CD4+ TH细胞,通过RT-PCR、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定CD4+TH细胞中β-1,4-GalTⅠ的表达与定位;分别用rhIL-2、rhIL-12、rhIL-4等细胞因子组合诱导CD4+ TH细胞活化分化,通过半定量RT-PCR、FCM检测CD4+ TH细胞中β-1,4-GalTⅠ的表达变化,运用层黏连蛋白结合实验比较CD4+ TH细胞黏附能力的改变;用α-乳清蛋白干扰CD4+ TH细胞表面β-1,4-GalTⅠ的活性及底物特异性,用层黏连蛋白结合实验分析其对CD4+ TH细胞黏附能力的影响.结果 CD4+ TH细胞表面和细胞浆内表达长型和短型β-1,4-GalTⅠ;rhlL-2活化的CD4+ TH细胞长型β-1,4-GalT ⅠmRNA平及细胞膜表面β-1,4-GalTⅠ表达水平、细胞黏附能力均高于未经活化的CD4+ TH细胞,rhIL-2+rhIL-12诱导培养的CD4+ TH细胞增强更明显;CD4+ TH细胞长型β-1,4-GalTⅠ mRNA水平及细胞膜表面β-1,4-GalTⅠ表达水平均与CD4+ TH细胞黏附能力呈正相关;α-乳清蛋白干扰后CD4+ TH细胞黏附能力降低.结论 β-1,4-GalTⅠ在CD4+ TH细胞中表达,且与细胞黏附能力密切相关,提示β-1,4-GalTⅠ可能在CD4+ TH细胞的黏附过程中发挥重要作用.
目的 研究β-1,4-半乳糖基轉移酶Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferaseⅠ,β-1,4-GalT Ⅰ)在CD4+TH中的錶達與定位以及β-1,4-GalTⅠ對CD4+ TH細胞黏附能力的影響.方法 採用免疫磁珠暘性分選法分離純化CD4+ TH細胞,通過RT-PCR、熒光免疫細胞化學法和激光共聚焦技術鑒定CD4+TH細胞中β-1,4-GalTⅠ的錶達與定位;分彆用rhIL-2、rhIL-12、rhIL-4等細胞因子組閤誘導CD4+ TH細胞活化分化,通過半定量RT-PCR、FCM檢測CD4+ TH細胞中β-1,4-GalTⅠ的錶達變化,運用層黏連蛋白結閤實驗比較CD4+ TH細胞黏附能力的改變;用α-乳清蛋白榦擾CD4+ TH細胞錶麵β-1,4-GalTⅠ的活性及底物特異性,用層黏連蛋白結閤實驗分析其對CD4+ TH細胞黏附能力的影響.結果 CD4+ TH細胞錶麵和細胞漿內錶達長型和短型β-1,4-GalTⅠ;rhlL-2活化的CD4+ TH細胞長型β-1,4-GalT ⅠmRNA平及細胞膜錶麵β-1,4-GalTⅠ錶達水平、細胞黏附能力均高于未經活化的CD4+ TH細胞,rhIL-2+rhIL-12誘導培養的CD4+ TH細胞增彊更明顯;CD4+ TH細胞長型β-1,4-GalTⅠ mRNA水平及細胞膜錶麵β-1,4-GalTⅠ錶達水平均與CD4+ TH細胞黏附能力呈正相關;α-乳清蛋白榦擾後CD4+ TH細胞黏附能力降低.結論 β-1,4-GalTⅠ在CD4+ TH細胞中錶達,且與細胞黏附能力密切相關,提示β-1,4-GalTⅠ可能在CD4+ TH細胞的黏附過程中髮揮重要作用.
목적 연구β-1,4-반유당기전이매Ⅰ(β-1,4-galactosyltransferaseⅠ,β-1,4-GalT Ⅰ)재CD4+TH중적표체여정위이급β-1,4-GalTⅠ대CD4+ TH세포점부능력적영향.방법 채용면역자주양성분선법분리순화CD4+ TH세포,통과RT-PCR、형광면역세포화학법화격광공취초기술감정CD4+TH세포중β-1,4-GalTⅠ적표체여정위;분별용rhIL-2、rhIL-12、rhIL-4등세포인자조합유도CD4+ TH세포활화분화,통과반정량RT-PCR、FCM검측CD4+ TH세포중β-1,4-GalTⅠ적표체변화,운용층점련단백결합실험비교CD4+ TH세포점부능력적개변;용α-유청단백간우CD4+ TH세포표면β-1,4-GalTⅠ적활성급저물특이성,용층점련단백결합실험분석기대CD4+ TH세포점부능력적영향.결과 CD4+ TH세포표면화세포장내표체장형화단형β-1,4-GalTⅠ;rhlL-2활화적CD4+ TH세포장형β-1,4-GalT ⅠmRNA평급세포막표면β-1,4-GalTⅠ표체수평、세포점부능력균고우미경활화적CD4+ TH세포,rhIL-2+rhIL-12유도배양적CD4+ TH세포증강경명현;CD4+ TH세포장형β-1,4-GalTⅠ mRNA수평급세포막표면β-1,4-GalTⅠ표체수평균여CD4+ TH세포점부능력정정상관;α-유청단백간우후CD4+ TH세포점부능력강저.결론 β-1,4-GalTⅠ재CD4+ TH세포중표체,차여세포점부능력밀절상관,제시β-1,4-GalTⅠ가능재CD4+ TH세포적점부과정중발휘중요작용.
