中华眼科杂志
中華眼科雜誌
중화안과잡지
Chinese Journal of Ophthalmology
2007年
3期
266-270
,共5页
李瑾%褚仁远%瞿小妹%胡敏%笪翠弟
李瑾%褚仁遠%瞿小妹%鬍敏%笪翠弟
리근%저인원%구소매%호민%달취제
近视%形状知觉%视蛋白%豚鼠
近視%形狀知覺%視蛋白%豚鼠
근시%형상지각%시단백%돈서
目的 探讨形觉剥夺对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响.方法 出生1周的豚鼠28只,分为正常对照组和形觉剥夺组,各14只,按自然亮暗周期饲养.形觉剥夺组随机选取一只眼以半透明橡胶遮盖,正常对照组随机选择一眼作为对照.4周后取眼球行RT-PCR检测神经视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的mRNA表达,并进行豚鼠视网膜铺片后免疫组织化学方法观察两种视蛋白的分布和表达密度,一抗为兔抗鼠红/绿锥视蛋白抗体或蓝锥视蛋白抗体,二抗为羊抗兔IgG带488荧光抗体.以Leica光学显微镜和Leica共聚焦显微镜观察豚鼠视网膜腹侧(下方)和背侧(上方)及中央区的锥细胞视蛋白的表达.结果 实验前屈光状态为:对照眼(5.63±0.87)D,形觉剥夺处理眼(5.47±1.02)D,4周后屈光状态分别为:对照眼(4.38±1.02)D,形觉剥夺处理眼(-3.03±0.78)D;屈光度的改变分别为:(-1.25+0.53)和(-8.38±1.44)D.正常豚鼠的视网膜短波敏感锥细胞分布为腹侧(下方)多于背侧(上方);中央密度最高,密度变化为突变.豚鼠的中波敏感锥细胞分布在背部(上方)多于腹侧(下方),中央密度最高,密度变化为渐变;正常组短波敏感蛋白的表达密度:下方为(805.0±203.3)mm-2,上方为(100.0±57.7)mm-2;中央为(1637.2±314.1)mm-2.形觉剥夺组:下方为(640.9±196.8)mm-2;中央为:(1016.7±144.6)mm-2,上方为(70.9±30.8)mm-2;正常组M-视蛋白的表达密度:上方为(946.2±388.5)mm-2,中心为(1666.7±137.8)mm-2,下方为(175.0±100.9)mm-2;形觉剥夺组:上方为(1436.7±366.0)mm-2,中心为:(2780.0±180.5)mm-2,下方为(318.2±172.7)mm-2.RT-PCR检测示形觉剥夺眼和对照眼的M-视蛋白的相对吸光度值分别为1.06±0.07和0.51±0.10,S-视蛋白的吸光度值分别为0.70±0.07和1.25±0.06.形觉剥夺性近视眼视网膜3个观察区域M-视蛋白的表达均较正常对照增加,S-视蛋白的表达减少,两因素方差分析示差别均有统计学意义(P＜0.05).结论 形觉剥夺性近视眼M-视蛋白的表达增加,S-视蛋白的表达减少,提示感光细胞锥细胞的视蛋白表达有可能在近视的发生发展中起了作用.
目的 探討形覺剝奪對豚鼠錐細胞視蛋白錶達的影響.方法 齣生1週的豚鼠28隻,分為正常對照組和形覺剝奪組,各14隻,按自然亮暗週期飼養.形覺剝奪組隨機選取一隻眼以半透明橡膠遮蓋,正常對照組隨機選擇一眼作為對照.4週後取眼毬行RT-PCR檢測神經視網膜M-視蛋白和S-視蛋白的mRNA錶達,併進行豚鼠視網膜鋪片後免疫組織化學方法觀察兩種視蛋白的分佈和錶達密度,一抗為兔抗鼠紅/綠錐視蛋白抗體或藍錐視蛋白抗體,二抗為羊抗兔IgG帶488熒光抗體.以Leica光學顯微鏡和Leica共聚焦顯微鏡觀察豚鼠視網膜腹側(下方)和揹側(上方)及中央區的錐細胞視蛋白的錶達.結果 實驗前屈光狀態為:對照眼(5.63±0.87)D,形覺剝奪處理眼(5.47±1.02)D,4週後屈光狀態分彆為:對照眼(4.38±1.02)D,形覺剝奪處理眼(-3.03±0.78)D;屈光度的改變分彆為:(-1.25+0.53)和(-8.38±1.44)D.正常豚鼠的視網膜短波敏感錐細胞分佈為腹側(下方)多于揹側(上方);中央密度最高,密度變化為突變.豚鼠的中波敏感錐細胞分佈在揹部(上方)多于腹側(下方),中央密度最高,密度變化為漸變;正常組短波敏感蛋白的錶達密度:下方為(805.0±203.3)mm-2,上方為(100.0±57.7)mm-2;中央為(1637.2±314.1)mm-2.形覺剝奪組:下方為(640.9±196.8)mm-2;中央為:(1016.7±144.6)mm-2,上方為(70.9±30.8)mm-2;正常組M-視蛋白的錶達密度:上方為(946.2±388.5)mm-2,中心為(1666.7±137.8)mm-2,下方為(175.0±100.9)mm-2;形覺剝奪組:上方為(1436.7±366.0)mm-2,中心為:(2780.0±180.5)mm-2,下方為(318.2±172.7)mm-2.RT-PCR檢測示形覺剝奪眼和對照眼的M-視蛋白的相對吸光度值分彆為1.06±0.07和0.51±0.10,S-視蛋白的吸光度值分彆為0.70±0.07和1.25±0.06.形覺剝奪性近視眼視網膜3箇觀察區域M-視蛋白的錶達均較正常對照增加,S-視蛋白的錶達減少,兩因素方差分析示差彆均有統計學意義(P＜0.05).結論 形覺剝奪性近視眼M-視蛋白的錶達增加,S-視蛋白的錶達減少,提示感光細胞錐細胞的視蛋白錶達有可能在近視的髮生髮展中起瞭作用.
목적 탐토형각박탈대돈서추세포시단백표체적영향.방법 출생1주적돈서28지,분위정상대조조화형각박탈조,각14지,안자연량암주기사양.형각박탈조수궤선취일지안이반투명상효차개,정상대조조수궤선택일안작위대조.4주후취안구행RT-PCR검측신경시망막M-시단백화S-시단백적mRNA표체,병진행돈서시망막포편후면역조직화학방법관찰량충시단백적분포화표체밀도,일항위토항서홍/록추시단백항체혹람추시단백항체,이항위양항토IgG대488형광항체.이Leica광학현미경화Leica공취초현미경관찰돈서시망막복측(하방)화배측(상방)급중앙구적추세포시단백적표체.결과 실험전굴광상태위:대조안(5.63±0.87)D,형각박탈처리안(5.47±1.02)D,4주후굴광상태분별위:대조안(4.38±1.02)D,형각박탈처리안(-3.03±0.78)D;굴광도적개변분별위:(-1.25+0.53)화(-8.38±1.44)D.정상돈서적시망막단파민감추세포분포위복측(하방)다우배측(상방);중앙밀도최고,밀도변화위돌변.돈서적중파민감추세포분포재배부(상방)다우복측(하방),중앙밀도최고,밀도변화위점변;정상조단파민감단백적표체밀도:하방위(805.0±203.3)mm-2,상방위(100.0±57.7)mm-2;중앙위(1637.2±314.1)mm-2.형각박탈조:하방위(640.9±196.8)mm-2;중앙위:(1016.7±144.6)mm-2,상방위(70.9±30.8)mm-2;정상조M-시단백적표체밀도:상방위(946.2±388.5)mm-2,중심위(1666.7±137.8)mm-2,하방위(175.0±100.9)mm-2;형각박탈조:상방위(1436.7±366.0)mm-2,중심위:(2780.0±180.5)mm-2,하방위(318.2±172.7)mm-2.RT-PCR검측시형각박탈안화대조안적M-시단백적상대흡광도치분별위1.06±0.07화0.51±0.10,S-시단백적흡광도치분별위0.70±0.07화1.25±0.06.형각박탈성근시안시망막3개관찰구역M-시단백적표체균교정상대조증가,S-시단백적표체감소,량인소방차분석시차별균유통계학의의(P＜0.05).결론 형각박탈성근시안M-시단백적표체증가,S-시단백적표체감소,제시감광세포추세포적시단백표체유가능재근시적발생발전중기료작용.
