中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
5期
401-404
,共4页
吴星%张华远%王佑春%李卓%林京香%蓝海云%辜文洁%李河民
吳星%張華遠%王祐春%李卓%林京香%藍海雲%辜文潔%李河民
오성%장화원%왕우춘%리탁%림경향%람해운%고문길%리하민
戊型肝炎%IgG%IgM%酶联免疫吸附测定
戊型肝炎%IgG%IgM%酶聯免疫吸附測定
무형간염%IgG%IgM%매련면역흡부측정
目的表达戊型肝炎病毒(HEV)Ⅰ型ORF3全长基因片段,纯化表达产物并进行抗原性分析. 方法将Ⅰ型HEV ORF3基因连接到融合表达载体pThioHis B, IPTG诱导表达;Western blot分析表达产物的抗原活性;用经高效液相色谱纯化的表达产物作为抗原,制备血清抗-HEV IgG及抗-HEV IgM诊断试剂,用国家参考品进行考核;用所得抗原检测临床血清中抗-HEV抗体,比较其与Genelabs试剂盒检测结果的差异. 结果含有Ⅰ型pThioHis B/ORF3质粒的菌株表达了相对分子质量(Mr)为26×103的融合蛋白,免疫印迹表明其能与戊型肝炎患者恢复期血清发生特异性反应.国家参考品考核结果显示,用表达产物制备的抗HEV IgG诊断试剂阳性符合率为100%(10/10),阴性符合率为96.7%(29/30),总符合率为97.5%(39/40);制备的抗-HEV IgM诊断试剂阳性符合率为83.3%(10/12),阴性符合率为100%(20/20),总符合率为93.8%(30/32).与Genelabs公司试剂盒检测结果比较,抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA总符合率分别为94.5%和87.0%. 结论本实验所得全长ORF3基因工程表达产物具有良好的抗原性,可用于制备抗-HEV诊断试剂.
目的錶達戊型肝炎病毒(HEV)Ⅰ型ORF3全長基因片段,純化錶達產物併進行抗原性分析. 方法將Ⅰ型HEV ORF3基因連接到融閤錶達載體pThioHis B, IPTG誘導錶達;Western blot分析錶達產物的抗原活性;用經高效液相色譜純化的錶達產物作為抗原,製備血清抗-HEV IgG及抗-HEV IgM診斷試劑,用國傢參攷品進行攷覈;用所得抗原檢測臨床血清中抗-HEV抗體,比較其與Genelabs試劑盒檢測結果的差異. 結果含有Ⅰ型pThioHis B/ORF3質粒的菌株錶達瞭相對分子質量(Mr)為26×103的融閤蛋白,免疫印跡錶明其能與戊型肝炎患者恢複期血清髮生特異性反應.國傢參攷品攷覈結果顯示,用錶達產物製備的抗HEV IgG診斷試劑暘性符閤率為100%(10/10),陰性符閤率為96.7%(29/30),總符閤率為97.5%(39/40);製備的抗-HEV IgM診斷試劑暘性符閤率為83.3%(10/12),陰性符閤率為100%(20/20),總符閤率為93.8%(30/32).與Genelabs公司試劑盒檢測結果比較,抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA總符閤率分彆為94.5%和87.0%. 結論本實驗所得全長ORF3基因工程錶達產物具有良好的抗原性,可用于製備抗-HEV診斷試劑.
목적표체무형간염병독(HEV)Ⅰ형ORF3전장기인편단,순화표체산물병진행항원성분석. 방법장Ⅰ형HEV ORF3기인련접도융합표체재체pThioHis B, IPTG유도표체;Western blot분석표체산물적항원활성;용경고효액상색보순화적표체산물작위항원,제비혈청항-HEV IgG급항-HEV IgM진단시제,용국가삼고품진행고핵;용소득항원검측림상혈청중항-HEV항체,비교기여Genelabs시제합검측결과적차이. 결과함유Ⅰ형pThioHis B/ORF3질립적균주표체료상대분자질량(Mr)위26×103적융합단백,면역인적표명기능여무형간염환자회복기혈청발생특이성반응.국가삼고품고핵결과현시,용표체산물제비적항HEV IgG진단시제양성부합솔위100%(10/10),음성부합솔위96.7%(29/30),총부합솔위97.5%(39/40);제비적항-HEV IgM진단시제양성부합솔위83.3%(10/12),음성부합솔위100%(20/20),총부합솔위93.8%(30/32).여Genelabs공사시제합검측결과비교,항-HEV IgG화항-HEV IgM ELISA총부합솔분별위94.5%화87.0%. 결론본실험소득전장ORF3기인공정표체산물구유량호적항원성,가용우제비항-HEV진단시제.
