CAJ | 학술논문

目的建立人内皮祖细胞(hEPCs)离体培养的方法,探讨培养条件,观察细胞生长状态、形态.xd同时行大鼠EPCs(rEPCs)培养.建立hEPCs和rEPCs培养体系,比较两者不同的生长条件和生长状态.方法:取人脐带血80-120ml/袋,先分离单个核细胞,后使用磁珠细胞分选法(MACS),分选出CD 133+/VEGFR2+的细胞,进行流式细胞检测,发现双阳性细胞占48.79％.用差速贴壁法培养5-9天,倒置相差显微镜观察细胞形态并照相、免疫荧光染色后荧光显微镜下观察照相.取大鼠骨髓,冲洗骨髓腔,离心沉淀出细胞,差速贴壁培养法培养、观察.结果:(1) hEPCs在普通光镜下呈索条状、卵圆形.(2)细胞吞噬DiI-acLDL、UEA染料后可在荧光显微镜下特异显色,证明细胞有吞噬功能,推断为hEPCs.(3) CD133+/VEGFR2+的hEPCs细胞,占使用MACS筛选后细胞比例为48.79％.(4)从骨髓中分离出的rEPCs生长活力明显优于hEPCs.结论:(1)该方法培养的hEPCs和rEPCs生长活性好,在普通光镜下呈索条状、卵圆形或铺路石样；(2) hEPCs在细胞数量上可不少于rEPCs,从骨髓中培养出的rEPCs增殖力优于脐血来源的hEPCs.此实验比较并完善了两种不同来源内皮祖细胞培养的方法学及其生长特征,有利于根据不同的细胞培养特性来选择应用于内皮祖细胞的实验研究.
목적 건립인내피조세포(hEPCs)리체배양적방법,탐토배양조건,관찰세포생장상태、형태.xd동시행대서EPCs(rEPCs)배양.건립hEPCs화rEPCs배양체계,비교량자불동적생장조건화생장상태.방법:취인제대혈80-120ml/대,선분리단개핵세포,후사용자주세포분선법(MACS),분선출CD 133+/VEGFR2+적세포,진행류식세포검측,발현쌍양성세포점48.79％.용차속첩벽법배양5-9천,도치상차현미경관찰세포형태병조상、면역형광염색후형광현미경하관찰조상.취대서골수,충세골수강,리심침정출세포,차속첩벽배양법배양、관찰.결과:(1) hEPCs재보통광경하정색조상、란원형.(2)세포탄서DiI-acLDL、UEA염료후가재형광현미경하특이현색,증명세포유탄서공능,추단위hEPCs.(3) CD133+/VEGFR2+적hEPCs세포,점사용MACS사선후세포비례위48.79％.(4)종골수중분리출적rEPCs생장활력명현우우hEPCs.결론:(1)해방법배양적hEPCs화rEPCs생장활성호,재보통광경하정색조상、란원형혹포로석양；(2) hEPCs재세포수량상가불소우rEPCs,종골수중배양출적rEPCs증식력우우제혈래원적hEPCs.차실험비교병완선료량충불동래원내피조세포배양적방법학급기생장특정,유리우근거불동적세포배양특성래선택응용우내피조세포적실험연구.