CAJ | 학술논문

目的探索长期体外反搏对冠状动脉闭塞犬心肌微血管和血管新生作用的影响以及对循环和心肌局部血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法雄性Beagle犬12只,随机分为对照组(n=6)和反搏组(n=6),均用心导管法建立定向冠状动脉闭塞模型3 d后,反搏组接受体外反搏处理,每日1 h,持续共6周(每只犬反搏总时间28～30 h).血管细胞成分免疫标记技术比较心肌微血管的差异和血管新生作用.双抗体夹心ELISA法测定犬血清VEGF水平动态变化.免疫组化SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色超敏法)测定心肌组织局部VEGF的表达.RT-PCR检测心肌组织局部VEGF Mrna的表达.结果 (1)图像分析证实,反搏组犬缺血心肌组织内的微血管的数量显著高于对照组[α-actin:(11.8±5.3)支/HP比(3.4 ±1.2)支/HP,P＜0.05 ;FⅧ-r-Ag :(15.2±6.3)支/HP比(4.9±2.1)支/HP, P＜0.05].(2)冠状动脉急性闭塞后,两组犬的血清VEGF水平开始升高,在24 h均达到一峰值水平,随后VEGF水平下降,约在1周时降至最低.之后两组犬的血清VEGF水平有轻微增加,但组间变化差异无统计学意义.(3)反搏组犬缺血心肌组织的VEGF表达范围较广泛,但绝大部分仍分布于心肌细胞,少数分布于血管内皮细胞和成纤维细胞.相反,在对照组,心肌VEGF阳性表达的范围和强度均不及反搏组.(4)免疫组化图像分析发现,反搏组犬心肌VEGF表达的面积[(0.0353±0.0090)mm2比(0.0036±0.0008)mm2,P＜0.01]、吸光度指数[(3.0391±0.5121)比(0.3473±0.0840),P＜0.01)]均高于对照组;对两组心肌组织VEGF Mrna的表达进行半定量分析,结果反搏组犬心肌VEGF Mrna的表达显著高于对照组(P＜0.01),增加73.5%.结论长期体外反搏治疗促进冠状动脉侧支循环和新生血管形成,促进缺血心肌组织局部VEGF蛋白和Mrna水平的表达可能是体外反搏的治疗机制之一.
목적 탐색장기체외반박대관상동맥폐새견심기미혈관화혈관신생작용적영향이급대순배화심기국부혈관내피생장인자(VEGF)표체적영향.방법 웅성Beagle견12지,수궤분위대조조(n=6)화반박조(n=6),균용심도관법건립정향관상동맥폐새모형3 d후,반박조접수체외반박처리,매일1 h,지속공6주(매지견반박총시간28～30 h).혈관세포성분면역표기기술비교심기미혈관적차이화혈관신생작용.쌍항체협심ELISA법측정견혈청VEGF수평동태변화.면역조화SP법(련매균항생물소단백-과양화매면역조화염색초민법)측정심기조직국부VEGF적표체.RT-PCR검측심기조직국부VEGF Mrna적표체.결과 (1)도상분석증실,반박조견결혈심기조직내적미혈관적수량현저고우대조조[α-actin:(11.8±5.3)지/HP비(3.4 ±1.2)지/HP,P＜0.05 ;FⅧ-r-Ag :(15.2±6.3)지/HP비(4.9±2.1)지/HP, P＜0.05].(2)관상동맥급성폐새후,량조견적혈청VEGF수평개시승고,재24 h균체도일봉치수평,수후VEGF수평하강,약재1주시강지최저.지후량조견적혈청VEGF수평유경미증가,단조간변화차이무통계학의의.(3)반박조견결혈심기조직적VEGF표체범위교엄범,단절대부분잉분포우심기세포,소수분포우혈관내피세포화성섬유세포.상반,재대조조,심기VEGF양성표체적범위화강도균불급반박조.(4)면역조화도상분석발현,반박조견심기VEGF표체적면적[(0.0353±0.0090)mm2비(0.0036±0.0008)mm2,P＜0.01]、흡광도지수[(3.0391±0.5121)비(0.3473±0.0840),P＜0.01)]균고우대조조;대량조심기조직VEGF Mrna적표체진행반정량분석,결과반박조견심기VEGF Mrna적표체현저고우대조조(P＜0.01),증가73.5%.결론 장기체외반박치료촉진관상동맥측지순배화신생혈관형성,촉진결혈심기조직국부VEGF단백화Mrna수평적표체가능시체외반박적치료궤제지일.