科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2004年
17期
1737-1742
,共6页
张晋丹%刘彦信%刘士廉%郑德先
張晉丹%劉彥信%劉士廉%鄭德先
장진단%류언신%류사렴%정덕선
PKCδ 乳腺癌细胞 rsTRAIL RNA干扰
PKCδ 乳腺癌細胞 rsTRAIL RNA榦擾
PKCδ 유선암세포 rsTRAIL RNA간우
不同的乳腺癌细胞株对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的敏感性不同.为了揭示其分子机制,分别以对TRAIL敏感和不敏感的乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MCF-7)为模型,比较分析了这2株细胞对重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)的不同敏感性的分子机制.首先使用不同的抑制剂分别阻断细胞内3条主要存活通路(PKCδ,MAPK,PI3K)后,研究细胞对rsTRAIL的敏感性,结果表明,阻断这3条存活通路,都不影响MD-MB-231细胞对rsTRAIL的敏感性,说明MD-MB-231细胞对rsTRAIL敏感与这3条存活通路无关;以MEK1/2抑制剂阻断MAPK途径或以Ly294002阻断PI3K途径都不影响MCF-7细胞对rsTRAIL的敏感性;但以PKCδ抑制剂rottlerin抑制PKCδ活性,能显著促进rsTRAIL诱导的MCF-7细胞凋亡,提示PKCδ高表达可能是MCF-7细胞对rsTRAIL不敏感的重要原因.应用RNA干扰技术抑制PKCδ的表达,确证PKCδ高表达是MCF-7细胞对rsTRAIL不敏感的关键因素.同时,进一步证明caspase-3表达重建不能改变MCF-7细胞中PKCδ的总体表达水平,说明凋亡执行蛋白酶caspase-3缺陷,不是PKCδ高表达的主要原因.
不同的乳腺癌細胞株對腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)的敏感性不同.為瞭揭示其分子機製,分彆以對TRAIL敏感和不敏感的乳腺癌細胞株(MDA-MB-231和MCF-7)為模型,比較分析瞭這2株細胞對重組可溶性TRAIL(rsTRAIL)的不同敏感性的分子機製.首先使用不同的抑製劑分彆阻斷細胞內3條主要存活通路(PKCδ,MAPK,PI3K)後,研究細胞對rsTRAIL的敏感性,結果錶明,阻斷這3條存活通路,都不影響MD-MB-231細胞對rsTRAIL的敏感性,說明MD-MB-231細胞對rsTRAIL敏感與這3條存活通路無關;以MEK1/2抑製劑阻斷MAPK途徑或以Ly294002阻斷PI3K途徑都不影響MCF-7細胞對rsTRAIL的敏感性;但以PKCδ抑製劑rottlerin抑製PKCδ活性,能顯著促進rsTRAIL誘導的MCF-7細胞凋亡,提示PKCδ高錶達可能是MCF-7細胞對rsTRAIL不敏感的重要原因.應用RNA榦擾技術抑製PKCδ的錶達,確證PKCδ高錶達是MCF-7細胞對rsTRAIL不敏感的關鍵因素.同時,進一步證明caspase-3錶達重建不能改變MCF-7細胞中PKCδ的總體錶達水平,說明凋亡執行蛋白酶caspase-3缺陷,不是PKCδ高錶達的主要原因.
불동적유선암세포주대종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)적민감성불동.위료게시기분자궤제,분별이대TRAIL민감화불민감적유선암세포주(MDA-MB-231화MCF-7)위모형,비교분석료저2주세포대중조가용성TRAIL(rsTRAIL)적불동민감성적분자궤제.수선사용불동적억제제분별조단세포내3조주요존활통로(PKCδ,MAPK,PI3K)후,연구세포대rsTRAIL적민감성,결과표명,조단저3조존활통로,도불영향MD-MB-231세포대rsTRAIL적민감성,설명MD-MB-231세포대rsTRAIL민감여저3조존활통로무관;이MEK1/2억제제조단MAPK도경혹이Ly294002조단PI3K도경도불영향MCF-7세포대rsTRAIL적민감성;단이PKCδ억제제rottlerin억제PKCδ활성,능현저촉진rsTRAIL유도적MCF-7세포조망,제시PKCδ고표체가능시MCF-7세포대rsTRAIL불민감적중요원인.응용RNA간우기술억제PKCδ적표체,학증PKCδ고표체시MCF-7세포대rsTRAIL불민감적관건인소.동시,진일보증명caspase-3표체중건불능개변MCF-7세포중PKCδ적총체표체수평,설명조망집행단백매caspase-3결함,불시PKCδ고표체적주요원인.
