重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2005年
9期
1365-1367
,共3页
崔剑%陶国才%文欣荣%陈杰%易斌%鲁开智%毕敏
崔劍%陶國纔%文訢榮%陳傑%易斌%魯開智%畢敏
최검%도국재%문흔영%진걸%역빈%로개지%필민
凝血酶%抑肽酶%星形胶质细胞%即刻早期基因
凝血酶%抑肽酶%星形膠質細胞%即刻早期基因
응혈매%억태매%성형효질세포%즉각조기기인
目的以即刻早期基因c-fos和c-jun为标志物研究抑肽酶预处理对凝血酶诱导的星形胶质细胞内信号转导的改变,初步探讨大剂量凝血酶对星形胶质细胞损伤以及抑肽酶拮抗作用的机制,为进一步探讨抑肽酶的临床应用打下基础.方法以体外培养的星形胶质细胞为实验模型,采用在细胞培养基中混入抑肽酶和凝血酶的加药方式,利用免疫组织化学和免疫荧光技术,在显微镜下观测c-fos和c-jun基因在星形胶质细胞中的表达,计算两种基因在细胞内的阳性表达率,数据采用SPSS10.0进行卡方检验.结果体外原代培养的小鼠星形胶质细胞经纯化后纯度达到(93.5±3)%,药物处理24h后,T20组细胞阳性表达率为c-jun (71.74±0.74)%,c-fos (69.27±0.69)%,c-fos和c-jun二者表达趋势基本一致,其中A100组细胞阳性表达率非常显著地高于T20组(P<0.01),A300组显著高于T20组(P<0.05),A500与T20组无显著差异,A700组c-jun表达阳性率与T20组无显著性差别,而c-fos表达阳性率非常显著地低于T20组.结论小剂量抑肽酶可显著增加凝血酶诱导的即刻早期基因表达的细胞数目,但单个细胞表达的强度减弱,而大剂量的抑肽酶预处理使即刻早期基因表达的数目减少,表达强度增强,推测小剂量的抑肽酶可以逆转发生损伤的细胞,而大剂量时有促进已发生严重损伤的细胞进一步加重的可能.
目的以即刻早期基因c-fos和c-jun為標誌物研究抑肽酶預處理對凝血酶誘導的星形膠質細胞內信號轉導的改變,初步探討大劑量凝血酶對星形膠質細胞損傷以及抑肽酶拮抗作用的機製,為進一步探討抑肽酶的臨床應用打下基礎.方法以體外培養的星形膠質細胞為實驗模型,採用在細胞培養基中混入抑肽酶和凝血酶的加藥方式,利用免疫組織化學和免疫熒光技術,在顯微鏡下觀測c-fos和c-jun基因在星形膠質細胞中的錶達,計算兩種基因在細胞內的暘性錶達率,數據採用SPSS10.0進行卡方檢驗.結果體外原代培養的小鼠星形膠質細胞經純化後純度達到(93.5±3)%,藥物處理24h後,T20組細胞暘性錶達率為c-jun (71.74±0.74)%,c-fos (69.27±0.69)%,c-fos和c-jun二者錶達趨勢基本一緻,其中A100組細胞暘性錶達率非常顯著地高于T20組(P<0.01),A300組顯著高于T20組(P<0.05),A500與T20組無顯著差異,A700組c-jun錶達暘性率與T20組無顯著性差彆,而c-fos錶達暘性率非常顯著地低于T20組.結論小劑量抑肽酶可顯著增加凝血酶誘導的即刻早期基因錶達的細胞數目,但單箇細胞錶達的彊度減弱,而大劑量的抑肽酶預處理使即刻早期基因錶達的數目減少,錶達彊度增彊,推測小劑量的抑肽酶可以逆轉髮生損傷的細胞,而大劑量時有促進已髮生嚴重損傷的細胞進一步加重的可能.
목적이즉각조기기인c-fos화c-jun위표지물연구억태매예처리대응혈매유도적성형효질세포내신호전도적개변,초보탐토대제량응혈매대성형효질세포손상이급억태매길항작용적궤제,위진일보탐토억태매적림상응용타하기출.방법이체외배양적성형효질세포위실험모형,채용재세포배양기중혼입억태매화응혈매적가약방식,이용면역조직화학화면역형광기술,재현미경하관측c-fos화c-jun기인재성형효질세포중적표체,계산량충기인재세포내적양성표체솔,수거채용SPSS10.0진행잡방검험.결과체외원대배양적소서성형효질세포경순화후순도체도(93.5±3)%,약물처리24h후,T20조세포양성표체솔위c-jun (71.74±0.74)%,c-fos (69.27±0.69)%,c-fos화c-jun이자표체추세기본일치,기중A100조세포양성표체솔비상현저지고우T20조(P<0.01),A300조현저고우T20조(P<0.05),A500여T20조무현저차이,A700조c-jun표체양성솔여T20조무현저성차별,이c-fos표체양성솔비상현저지저우T20조.결론소제량억태매가현저증가응혈매유도적즉각조기기인표체적세포수목,단단개세포표체적강도감약,이대제량적억태매예처리사즉각조기기인표체적수목감소,표체강도증강,추측소제량적억태매가이역전발생손상적세포,이대제량시유촉진이발생엄중손상적세포진일보가중적가능.