生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
12期
103-109
,共7页
郭美娜%孙丽芳%杨光%邹宏达%苏胜忠%吴颖%原亚萍
郭美娜%孫麗芳%楊光%鄒宏達%囌勝忠%吳穎%原亞萍
곽미나%손려방%양광%추굉체%소성충%오영%원아평
玉米%直链淀粉%hpRNA%ADP-葡萄糖焦磷酸化酶%sbeⅡb 基因
玉米%直鏈澱粉%hpRNA%ADP-葡萄糖焦燐痠化酶%sbeⅡb 基因
옥미%직련정분%hpRNA%ADP-포도당초린산화매%sbeⅡb 기인
淀粉分支酶基因sbe是影响玉米直链淀粉含量的主要因素,淀粉分支酶分为3种即sbeⅠ、sbeⅡa和sbeⅡb,其中sbeⅡb对直链淀粉含量影响效应最大,抑制玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因的表达可减少支链淀粉的含量,从而达到提高直链淀粉的目的;ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是直链淀粉合成的关键酶,通过提高AGP表达量同样可提高玉米直链淀粉含量.以此为目的分别克隆了sbeⅡb一段375 bp高度保守区,玉米SBE基因一段175 bp内含子,AGP完整开放阅读框,大麦胚乳特异启动子和ADPG基因终止子.构建了sbeⅡb基因正、反义的hpRNA发夹结构,将该发夹结构与上述基因分别连接到pCAM-BIA3301上;构建得到包含sbeⅡb基因干扰结构与AGP基因过表达的pCAMB-RSA多基因胚乳特异表达载体.为此,pCAMB-RSA载体的成功构建将为高直链淀粉玉米的培育奠定基础.
澱粉分支酶基因sbe是影響玉米直鏈澱粉含量的主要因素,澱粉分支酶分為3種即sbeⅠ、sbeⅡa和sbeⅡb,其中sbeⅡb對直鏈澱粉含量影響效應最大,抑製玉米澱粉分支酶sbeⅡb基因的錶達可減少支鏈澱粉的含量,從而達到提高直鏈澱粉的目的;ADP-葡萄糖焦燐痠化酶(AGPase)是直鏈澱粉閤成的關鍵酶,通過提高AGP錶達量同樣可提高玉米直鏈澱粉含量.以此為目的分彆剋隆瞭sbeⅡb一段375 bp高度保守區,玉米SBE基因一段175 bp內含子,AGP完整開放閱讀框,大麥胚乳特異啟動子和ADPG基因終止子.構建瞭sbeⅡb基因正、反義的hpRNA髮夾結構,將該髮夾結構與上述基因分彆連接到pCAM-BIA3301上;構建得到包含sbeⅡb基因榦擾結構與AGP基因過錶達的pCAMB-RSA多基因胚乳特異錶達載體.為此,pCAMB-RSA載體的成功構建將為高直鏈澱粉玉米的培育奠定基礎.
정분분지매기인sbe시영향옥미직련정분함량적주요인소,정분분지매분위3충즉sbeⅠ、sbeⅡa화sbeⅡb,기중sbeⅡb대직련정분함량영향효응최대,억제옥미정분분지매sbeⅡb기인적표체가감소지련정분적함량,종이체도제고직련정분적목적;ADP-포도당초린산화매(AGPase)시직련정분합성적관건매,통과제고AGP표체량동양가제고옥미직련정분함량.이차위목적분별극륭료sbeⅡb일단375 bp고도보수구,옥미SBE기인일단175 bp내함자,AGP완정개방열독광,대맥배유특이계동자화ADPG기인종지자.구건료sbeⅡb기인정、반의적hpRNA발협결구,장해발협결구여상술기인분별련접도pCAM-BIA3301상;구건득도포함sbeⅡb기인간우결구여AGP기인과표체적pCAMB-RSA다기인배유특이표체재체.위차,pCAMB-RSA재체적성공구건장위고직련정분옥미적배육전정기출.
