中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2009年
3期
277-282
,共6页
孙颖杰%江育林%刘荭%高隆英%史秀杰%何俊强%王哲
孫穎傑%江育林%劉葒%高隆英%史秀傑%何俊彊%王哲
손영걸%강육림%류홍%고륭영%사수걸%하준강%왕철
石鲽鱼%牙鲆弹状病毒%分离%鉴定
石鰈魚%牙鲆彈狀病毒%分離%鑒定
석접어%아평탄상병독%분리%감정
从养殖石鲽鱼(Kareius bicoloratus)鱼苗中分离到1株弹状病毒(080113株).用研磨离心除菌后的组织匀浆液,接种11种鱼类细胞系.结果在鲤上皮瘤细胞(EPC)和肥头鲤细胞系(FHM)等8种细胞中均出现明显的细胞病变(Cytopathic effect,CPE),在鲤上皮瘤细胞(EPC)中的滴度最高.对该毒株的理化性质进行了测定,结果显示080113株对温度和pH敏感;对5′-碘-2′脱氧尿密啶(IUDR)不敏感;对氯仿敏感,提示是一种有囊膜的RNA病毒.制备电镜超薄切片,观察到在细胞质中有大小为(80～118)nm×(28～55)nm、形态为典型的弹状的病毒粒子.SDS-PAGE电泳分析该毒株的蛋白质图谱,结果表明该毒株有5条主要的蛋白带,相对分子质量大小分别为200 000、56 000、42 000、29 000和24 000.用传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)和牙鲆弹状病毒(HRV)等水生动物弹状病毒特异性引物对该毒株进行逆转录聚合酶链式反应,结果用HRV的引物能扩增出阳性片段.对该片段进行测序分析,发现与HRV的参考序列有99%以上的相似性.因此,初步鉴定该毒株为牙鲆弹状病毒.
從養殖石鰈魚(Kareius bicoloratus)魚苗中分離到1株彈狀病毒(080113株).用研磨離心除菌後的組織勻漿液,接種11種魚類細胞繫.結果在鯉上皮瘤細胞(EPC)和肥頭鯉細胞繫(FHM)等8種細胞中均齣現明顯的細胞病變(Cytopathic effect,CPE),在鯉上皮瘤細胞(EPC)中的滴度最高.對該毒株的理化性質進行瞭測定,結果顯示080113株對溫度和pH敏感;對5′-碘-2′脫氧尿密啶(IUDR)不敏感;對氯倣敏感,提示是一種有囊膜的RNA病毒.製備電鏡超薄切片,觀察到在細胞質中有大小為(80～118)nm×(28～55)nm、形態為典型的彈狀的病毒粒子.SDS-PAGE電泳分析該毒株的蛋白質圖譜,結果錶明該毒株有5條主要的蛋白帶,相對分子質量大小分彆為200 000、56 000、42 000、29 000和24 000.用傳染性造血器官壞死病毒(IHNV)、病毒性齣血性敗血癥病毒(VHSV)和牙鲆彈狀病毒(HRV)等水生動物彈狀病毒特異性引物對該毒株進行逆轉錄聚閤酶鏈式反應,結果用HRV的引物能擴增齣暘性片段.對該片段進行測序分析,髮現與HRV的參攷序列有99%以上的相似性.因此,初步鑒定該毒株為牙鲆彈狀病毒.
종양식석접어(Kareius bicoloratus)어묘중분리도1주탄상병독(080113주).용연마리심제균후적조직균장액,접충11충어류세포계.결과재리상피류세포(EPC)화비두리세포계(FHM)등8충세포중균출현명현적세포병변(Cytopathic effect,CPE),재리상피류세포(EPC)중적적도최고.대해독주적이화성질진행료측정,결과현시080113주대온도화pH민감;대5′-전-2′탈양뇨밀정(IUDR)불민감;대록방민감,제시시일충유낭막적RNA병독.제비전경초박절편,관찰도재세포질중유대소위(80～118)nm×(28～55)nm、형태위전형적탄상적병독입자.SDS-PAGE전영분석해독주적단백질도보,결과표명해독주유5조주요적단백대,상대분자질량대소분별위200 000、56 000、42 000、29 000화24 000.용전염성조혈기관배사병독(IHNV)、병독성출혈성패혈증병독(VHSV)화아평탄상병독(HRV)등수생동물탄상병독특이성인물대해독주진행역전록취합매련식반응,결과용HRV적인물능확증출양성편단.대해편단진행측서분석,발현여HRV적삼고서렬유99%이상적상사성.인차,초보감정해독주위아평탄상병독.
