华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2008年
6期
68-71
,共4页
李桂琴%李会宣%刘坤%许冬倩%张玉星
李桂琴%李會宣%劉坤%許鼕倩%張玉星
리계금%리회선%류곤%허동천%장옥성
梨%PPO基因%克隆%序列比较
梨%PPO基因%剋隆%序列比較
리%PPO기인%극륭%서렬비교
以4种不同来源的梨基因组DNA为模板,根据已经发表的多酚氧化酶基因序列设计引物,利用PCR技术,克隆到了鸭梨、雪花梨、砂梨、黄冠梨约1.8 kb的完整多酚氧化酶基因,将纯化后的扩增产物克隆到质粒pGEM-T vector中,转化DH-5α菌,挑选阳性克隆进行测序.利用Clustalx软件对PPO核苷酸序列进行了同源性分析,用DNAStar软件对PPO核苷酸序列进行进化树分析,并进行部分植物PPO氨基酸的同源性分析.结果表明,4种梨多酚氧化酶基因的蛋白编码区含有1 782个核苷酸,鸭梨基因已经在GenBank上登录,登录号为EU048225.梨多酚氧化酶基因与其他植物中的多酚氧化酶基因有较高的相似性,尤其在铜离子结合部位,所有的植物基本上一致;5种梨的同源性高达98%.基于植物PPO基因核苷酸序列的分子进化树显示,可分为两大类,梨的多酚氧化酶可以与大多数的木本植物聚合成一个组.
以4種不同來源的梨基因組DNA為模闆,根據已經髮錶的多酚氧化酶基因序列設計引物,利用PCR技術,剋隆到瞭鴨梨、雪花梨、砂梨、黃冠梨約1.8 kb的完整多酚氧化酶基因,將純化後的擴增產物剋隆到質粒pGEM-T vector中,轉化DH-5α菌,挑選暘性剋隆進行測序.利用Clustalx軟件對PPO覈苷痠序列進行瞭同源性分析,用DNAStar軟件對PPO覈苷痠序列進行進化樹分析,併進行部分植物PPO氨基痠的同源性分析.結果錶明,4種梨多酚氧化酶基因的蛋白編碼區含有1 782箇覈苷痠,鴨梨基因已經在GenBank上登錄,登錄號為EU048225.梨多酚氧化酶基因與其他植物中的多酚氧化酶基因有較高的相似性,尤其在銅離子結閤部位,所有的植物基本上一緻;5種梨的同源性高達98%.基于植物PPO基因覈苷痠序列的分子進化樹顯示,可分為兩大類,梨的多酚氧化酶可以與大多數的木本植物聚閤成一箇組.
이4충불동래원적리기인조DNA위모판,근거이경발표적다분양화매기인서렬설계인물,이용PCR기술,극륭도료압리、설화리、사리、황관리약1.8 kb적완정다분양화매기인,장순화후적확증산물극륭도질립pGEM-T vector중,전화DH-5α균,도선양성극륭진행측서.이용Clustalx연건대PPO핵감산서렬진행료동원성분석,용DNAStar연건대PPO핵감산서렬진행진화수분석,병진행부분식물PPO안기산적동원성분석.결과표명,4충리다분양화매기인적단백편마구함유1 782개핵감산,압리기인이경재GenBank상등록,등록호위EU048225.리다분양화매기인여기타식물중적다분양화매기인유교고적상사성,우기재동리자결합부위,소유적식물기본상일치;5충리적동원성고체98%.기우식물PPO기인핵감산서렬적분자진화수현시,가분위량대류,리적다분양화매가이여대다수적목본식물취합성일개조.
