中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2008年
11期
2191-2194
,共4页
袁利华%刘承武%姚琦%牛茂昌%李志杰%邓鹏%刘靖华%姜勇
袁利華%劉承武%姚琦%牛茂昌%李誌傑%鄧鵬%劉靖華%薑勇
원리화%류승무%요기%우무창%리지걸%산붕%류정화%강용
噬菌体展示%休克,脓毒性%肝%内皮细胞%特异性结合肽
噬菌體展示%休剋,膿毒性%肝%內皮細胞%特異性結閤肽
서균체전시%휴극,농독성%간%내피세포%특이성결합태
目的:利用体内噬菌体展示技术筛选能与内毒素休克小鼠肝脏血管特异性结合的短肽.方法:尾静脉注射噬菌体环七肽库至内毒素休克小鼠体内,循环10 min后,回收肝脏中的噬菌体.将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此为起始物进行下一轮筛选.经过4轮筛选后,将所得文库与正常小鼠做一次差减筛选.随机挑取噬菌体单克隆进行测序,序列分析后,进行噬菌体的体内回输实验及免疫组化分析,验证所筛得噬菌体克隆的导向情况.结果:经过4轮体内筛选,肝脏中噬菌体回收率逐步提高,证明噬菌体文库在肝脏血管中得到有效富集.DNA测序后发现,10条序列中有5条为LTTWAPA,体内回输实验和免疫组化实验均证实表达该序列的噬菌体能有效地靶向于休克小鼠肝脏血管内皮细胞.结论:筛选到的短肽LTTWAPA能特异性结合于内毒素休克小鼠肝脏血管内皮细胞,有可能对内毒素休克的治疗具有重要意义.
目的:利用體內噬菌體展示技術篩選能與內毒素休剋小鼠肝髒血管特異性結閤的短肽.方法:尾靜脈註射噬菌體環七肽庫至內毒素休剋小鼠體內,循環10 min後,迴收肝髒中的噬菌體.將迴收的噬菌體擴增、純化,併以此為起始物進行下一輪篩選.經過4輪篩選後,將所得文庫與正常小鼠做一次差減篩選.隨機挑取噬菌體單剋隆進行測序,序列分析後,進行噬菌體的體內迴輸實驗及免疫組化分析,驗證所篩得噬菌體剋隆的導嚮情況.結果:經過4輪體內篩選,肝髒中噬菌體迴收率逐步提高,證明噬菌體文庫在肝髒血管中得到有效富集.DNA測序後髮現,10條序列中有5條為LTTWAPA,體內迴輸實驗和免疫組化實驗均證實錶達該序列的噬菌體能有效地靶嚮于休剋小鼠肝髒血管內皮細胞.結論:篩選到的短肽LTTWAPA能特異性結閤于內毒素休剋小鼠肝髒血管內皮細胞,有可能對內毒素休剋的治療具有重要意義.
목적:이용체내서균체전시기술사선능여내독소휴극소서간장혈관특이성결합적단태.방법:미정맥주사서균체배칠태고지내독소휴극소서체내,순배10 min후,회수간장중적서균체.장회수적서균체확증、순화,병이차위기시물진행하일륜사선.경과4륜사선후,장소득문고여정상소서주일차차감사선.수궤도취서균체단극륭진행측서,서렬분석후,진행서균체적체내회수실험급면역조화분석,험증소사득서균체극륭적도향정황.결과:경과4륜체내사선,간장중서균체회수솔축보제고,증명서균체문고재간장혈관중득도유효부집.DNA측서후발현,10조서렬중유5조위LTTWAPA,체내회수실험화면역조화실험균증실표체해서렬적서균체능유효지파향우휴극소서간장혈관내피세포.결론:사선도적단태LTTWAPA능특이성결합우내독소휴극소서간장혈관내피세포,유가능대내독소휴극적치료구유중요의의.
