光谱学与光谱分析
光譜學與光譜分析
광보학여광보분석
SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS
2008年
11期
2615-2618
,共4页
林旭聪%燕瑾%郭良洽%谢增鸿
林旭聰%燕瑾%郭良洽%謝增鴻
림욱총%연근%곽량흡%사증홍
同步荧光%吲哚二聚体菁类探针%蛋白质测定
同步熒光%吲哚二聚體菁類探針%蛋白質測定
동보형광%신타이취체정류탐침%단백질측정
基于蛋白质对双嵌吲哚染料具有良好的荧光增强作用,以新型水溶性吲哚基同型二聚体探针Ⅰ,建立了一种灵敏的蛋白质同步荧光分析体系.实验考察了吲哚探针的荧光特征、吲哚探针浓度、缓冲体系pH、盐浓度等参数对体系荧光的影响.在酸性条件下,蛋白质分子与探针Ⅰ发生结合作用,同步荧光明显增强并向长波方向发生红移,且同步荧光强度与蛋白质浓度成良好的线性关系.在最优条件下,牛血清白蛋白BSA的线性响应范围5.00×10-7～2.50×10-5g·mL-1,检测限(3σ/K)为3×10-8g·mL-1;测定了血清蛋白BSA的合成样品,不同浓度BSA样品回收率为98.6%～103.0%,相对标准偏差1.1%～1.9%;与蛋白质紫外标准测定法比较,测定偏差为0.4%～3.9%.
基于蛋白質對雙嵌吲哚染料具有良好的熒光增彊作用,以新型水溶性吲哚基同型二聚體探針Ⅰ,建立瞭一種靈敏的蛋白質同步熒光分析體繫.實驗攷察瞭吲哚探針的熒光特徵、吲哚探針濃度、緩遲體繫pH、鹽濃度等參數對體繫熒光的影響.在痠性條件下,蛋白質分子與探針Ⅰ髮生結閤作用,同步熒光明顯增彊併嚮長波方嚮髮生紅移,且同步熒光彊度與蛋白質濃度成良好的線性關繫.在最優條件下,牛血清白蛋白BSA的線性響應範圍5.00×10-7～2.50×10-5g·mL-1,檢測限(3σ/K)為3×10-8g·mL-1;測定瞭血清蛋白BSA的閤成樣品,不同濃度BSA樣品迴收率為98.6%～103.0%,相對標準偏差1.1%～1.9%;與蛋白質紫外標準測定法比較,測定偏差為0.4%～3.9%.
기우단백질대쌍감신타염료구유량호적형광증강작용,이신형수용성신타기동형이취체탐침Ⅰ,건립료일충령민적단백질동보형광분석체계.실험고찰료신타탐침적형광특정、신타탐침농도、완충체계pH、염농도등삼수대체계형광적영향.재산성조건하,단백질분자여탐침Ⅰ발생결합작용,동보형광명현증강병향장파방향발생홍이,차동보형광강도여단백질농도성량호적선성관계.재최우조건하,우혈청백단백BSA적선성향응범위5.00×10-7～2.50×10-5g·mL-1,검측한(3σ/K)위3×10-8g·mL-1;측정료혈청단백BSA적합성양품,불동농도BSA양품회수솔위98.6%～103.0%,상대표준편차1.1%～1.9%;여단백질자외표준측정법비교,측정편차위0.4%～3.9%.
