国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2008年
4期
708-710
,共3页
缺氧%RNA干扰%ILK%HIF-1α
缺氧%RNA榦擾%ILK%HIF-1α
결양%RNA간우%ILK%HIF-1α
目的:探讨干扰RNA(siRNA)沉默缺氧培养下人的视网膜色素上皮细胞(hRPE)中整合素连接激酶(ILK)的表达及其对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响.方法:CoCl2建立hRPE细胞的化学缺氧模型,Western blot和RT-PCR方法半定量检测不同缺氧时间(0,6,12,24,48h)hRPE细胞中ILK、HIF-1α蛋白及其mRNA的表达;阳离子脂质体转染ILK的干扰片段抑制缺氧24h hRPE细胞中ILK的表达,同上方法检测转染后缺氧24h hRPE细胞中ILK的表达及其对HIF-1α表达的影响.结果:ILK表达于正常及缺氧培养的hRPE细胞中.随着hRPE细胞缺氧时间的延长,在蛋白和mRNA水平ILK、HIF-1α都呈现逐渐增加的表达趋势.siRNA抑制ILK在缺氧24h hRPE细胞中的表达,同时显著抑制了HIF-1α的表达,较阴性对照组、单纯脂质体组有显著差异(P<0.01).结论:ILK可以通过HIF途径应答RPE细胞的缺氧反应.
目的:探討榦擾RNA(siRNA)沉默缺氧培養下人的視網膜色素上皮細胞(hRPE)中整閤素連接激酶(ILK)的錶達及其對缺氧誘導因子1α(HIF-1α)錶達的影響.方法:CoCl2建立hRPE細胞的化學缺氧模型,Western blot和RT-PCR方法半定量檢測不同缺氧時間(0,6,12,24,48h)hRPE細胞中ILK、HIF-1α蛋白及其mRNA的錶達;暘離子脂質體轉染ILK的榦擾片段抑製缺氧24h hRPE細胞中ILK的錶達,同上方法檢測轉染後缺氧24h hRPE細胞中ILK的錶達及其對HIF-1α錶達的影響.結果:ILK錶達于正常及缺氧培養的hRPE細胞中.隨著hRPE細胞缺氧時間的延長,在蛋白和mRNA水平ILK、HIF-1α都呈現逐漸增加的錶達趨勢.siRNA抑製ILK在缺氧24h hRPE細胞中的錶達,同時顯著抑製瞭HIF-1α的錶達,較陰性對照組、單純脂質體組有顯著差異(P<0.01).結論:ILK可以通過HIF途徑應答RPE細胞的缺氧反應.
목적:탐토간우RNA(siRNA)침묵결양배양하인적시망막색소상피세포(hRPE)중정합소련접격매(ILK)적표체급기대결양유도인자1α(HIF-1α)표체적영향.방법:CoCl2건립hRPE세포적화학결양모형,Western blot화RT-PCR방법반정량검측불동결양시간(0,6,12,24,48h)hRPE세포중ILK、HIF-1α단백급기mRNA적표체;양리자지질체전염ILK적간우편단억제결양24h hRPE세포중ILK적표체,동상방법검측전염후결양24h hRPE세포중ILK적표체급기대HIF-1α표체적영향.결과:ILK표체우정상급결양배양적hRPE세포중.수착hRPE세포결양시간적연장,재단백화mRNA수평ILK、HIF-1α도정현축점증가적표체추세.siRNA억제ILK재결양24h hRPE세포중적표체,동시현저억제료HIF-1α적표체,교음성대조조、단순지질체조유현저차이(P<0.01).결론:ILK가이통과HIF도경응답RPE세포적결양반응.
