东南大学学报(医学版)
東南大學學報(醫學版)
동남대학학보(의학판)
JOURNAL OF NANJING RAILWAY MEDICAL COLLEGE
2008年
1期
6-10
,共5页
金月玲%田小强%商延芳%黄培林
金月玲%田小彊%商延芳%黃培林
금월령%전소강%상연방%황배림
DLC-1基因%甲基化%结肠癌细胞株%甲基化特异性PCR
DLC-1基因%甲基化%結腸癌細胞株%甲基化特異性PCR
DLC-1기인%갑기화%결장암세포주%갑기화특이성PCR
目的:研究候选抑癌基因DLC-1在结肠癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨结肠癌细胞株DLC-1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性.方法:采用RT-PCR技术分别检测DLC-1基因在人结肠癌细胞株CaCo-2、HT-29和LoVo中的表达水平;应用甲基化特异性PCR(MSP)方法和亚硫酸氢盐修饰DNA测序检测启动子区域甲基化状态;分别用0、5、10 μmol·L-1浓度的去甲基化药物5氮杂胞苷处理DLC-1基因启动子区域高甲基化状态细胞后,再检测DLC-1基因mRNA表达水平.结果:人结肠癌细胞株CaCo-2和LoVo中DLC-1 mRNA呈阳性表达,HT-29中的表达呈阴性表达;CaCo-2和LoVo细胞DLC-1基因启动子区域未发生甲基化,而HT-29出现启动子区高甲基化状态;经5氮杂胞苷药物干预后,HT-29结肠癌细胞的DLC-1基因表达明显增强.结论:结肠癌细胞株HT-29中DLC-1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关.
目的:研究候選抑癌基因DLC-1在結腸癌細胞株中的錶達及其啟動子區的甲基化狀態,初步探討結腸癌細胞株DLC-1基因錶達水平與其啟動子區甲基化的相關性.方法:採用RT-PCR技術分彆檢測DLC-1基因在人結腸癌細胞株CaCo-2、HT-29和LoVo中的錶達水平;應用甲基化特異性PCR(MSP)方法和亞硫痠氫鹽脩飾DNA測序檢測啟動子區域甲基化狀態;分彆用0、5、10 μmol·L-1濃度的去甲基化藥物5氮雜胞苷處理DLC-1基因啟動子區域高甲基化狀態細胞後,再檢測DLC-1基因mRNA錶達水平.結果:人結腸癌細胞株CaCo-2和LoVo中DLC-1 mRNA呈暘性錶達,HT-29中的錶達呈陰性錶達;CaCo-2和LoVo細胞DLC-1基因啟動子區域未髮生甲基化,而HT-29齣現啟動子區高甲基化狀態;經5氮雜胞苷藥物榦預後,HT-29結腸癌細胞的DLC-1基因錶達明顯增彊.結論:結腸癌細胞株HT-29中DLC-1基因錶達沉默與啟動子區高甲基化狀態有關.
목적:연구후선억암기인DLC-1재결장암세포주중적표체급기계동자구적갑기화상태,초보탐토결장암세포주DLC-1기인표체수평여기계동자구갑기화적상관성.방법:채용RT-PCR기술분별검측DLC-1기인재인결장암세포주CaCo-2、HT-29화LoVo중적표체수평;응용갑기화특이성PCR(MSP)방법화아류산경염수식DNA측서검측계동자구역갑기화상태;분별용0、5、10 μmol·L-1농도적거갑기화약물5담잡포감처리DLC-1기인계동자구역고갑기화상태세포후,재검측DLC-1기인mRNA표체수평.결과:인결장암세포주CaCo-2화LoVo중DLC-1 mRNA정양성표체,HT-29중적표체정음성표체;CaCo-2화LoVo세포DLC-1기인계동자구역미발생갑기화,이HT-29출현계동자구고갑기화상태;경5담잡포감약물간예후,HT-29결장암세포적DLC-1기인표체명현증강.결론:결장암세포주HT-29중DLC-1기인표체침묵여계동자구고갑기화상태유관.