犬瘟热病毒Yunnan株H基因的克隆与表达
견온열병독Yunnan주H기인적극륭여표체
Cloning and Expression of the H Protein Fragment of Canine distemper virus Yunnan Strain
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2008年 1期 9-12 ,共4页

    聂福平%李作生%邱薇%张富强%张连江%宋贵强%龙贵伟%廖金%任玉莹%余方芳%张泉鹏%王灵强%范泉水

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    犬瘟热病毒%H基因%克隆与表达%免疫印迹 犬瘟熱病毒%H基因%剋隆與錶達%免疫印跡
    견온열병독%H기인%극륭여표체%면역인적
    根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增出H基因的939 bp(H基因前段,H1)和920 bp(H基因后段,H2)片段,分别将其定向克隆于PET-28a(+)中,将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3)plysS,在35℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下获得良好表达,经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白为34 ku,与预期大小一致.免疫印迹试验显示,该重组蛋白可被CDV Onderstepoort株多克隆抗体识别,表明该重组蛋白具有抗原性.
    근거이발표적견온열병독(CDV)Onderstepoort주적서렬설계량대인물,이견온열병독운남주감염적Vero세포수획병독제취적총RNA위모판,RT-PCR확증출H기인적939 bp(H기인전단,H1)화920 bp(H기인후단,H2)편단,분별장기정향극륭우PET-28a(+)중,장중조질립전화숙주균BL21(DE3)plysS,재35℃、1.0 mmol/L IPTG유도하획득량호표체,경SDS-PAGE감정,표체적융합단백위34 ku,여예기대소일치.면역인적시험현시,해중조단백가피CDV Onderstepoort주다극륭항체식별,표명해중조단백구유항원성.
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