中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2007年
11期
2258-2261
,共4页
周欣阳%张天一%顾君一%丁斐
週訢暘%張天一%顧君一%丁斐
주흔양%장천일%고군일%정비
天花粉素%黑色素瘤%B-16细胞%钙%活性氧%一氧化氮
天花粉素%黑色素瘤%B-16細胞%鈣%活性氧%一氧化氮
천화분소%흑색소류%B-16세포%개%활성양%일양화담
目的:研究天花粉蛋白(TCS)对黑色素瘤B-16细胞的作用,探讨天花粉蛋白抗肿瘤的机制.方法:(1)应用单细胞电泳及Hoechst33258染核形态观察来研究TCS对黑色素瘤B-16细胞损伤作用.(2)应用激光共聚焦扫描显微术结合特异性荧光探针Fluo-3/AM、H2 DCF-DA和DAF-FM diacetate观察在TCS作用下,单个瘤细胞内钙离子(Ca2+)、-氧化氮(NO)和活性氧(ROS)的信号动态变化,并探讨细胞内ROS和NO的增加与钙离子的关系.结果:(1)终浓度50mg/L TCS孵育3 h、6 h后,单细胞电泳、Hoechst33258染色的核形态观察未发现与对照组有明显区别;孵育12 h后单细胞电泳可见DNA损伤的特征性现象-彗星尾巴;Hoechst33258染色的核形态观察发现有明显的核浓缩和边集现象,出现特征性凋亡小体.(2)终浓度50 mg/L的TCS可引起细胞内Ca2+、NO和ROS的生成量明显高于对照组(P＜0.01).细胞内ROS和NO的增加与钙离子的增加密切相关.结论:天花粉蛋白对黑色素瘤B-16细胞DNA具有较强损伤作用,可诱导其发生凋亡;天花粉蛋白诱导凋亡可能与细胞内钙、ROS和NO的增加有关.
目的:研究天花粉蛋白(TCS)對黑色素瘤B-16細胞的作用,探討天花粉蛋白抗腫瘤的機製.方法:(1)應用單細胞電泳及Hoechst33258染覈形態觀察來研究TCS對黑色素瘤B-16細胞損傷作用.(2)應用激光共聚焦掃描顯微術結閤特異性熒光探針Fluo-3/AM、H2 DCF-DA和DAF-FM diacetate觀察在TCS作用下,單箇瘤細胞內鈣離子(Ca2+)、-氧化氮(NO)和活性氧(ROS)的信號動態變化,併探討細胞內ROS和NO的增加與鈣離子的關繫.結果:(1)終濃度50mg/L TCS孵育3 h、6 h後,單細胞電泳、Hoechst33258染色的覈形態觀察未髮現與對照組有明顯區彆;孵育12 h後單細胞電泳可見DNA損傷的特徵性現象-彗星尾巴;Hoechst33258染色的覈形態觀察髮現有明顯的覈濃縮和邊集現象,齣現特徵性凋亡小體.(2)終濃度50 mg/L的TCS可引起細胞內Ca2+、NO和ROS的生成量明顯高于對照組(P＜0.01).細胞內ROS和NO的增加與鈣離子的增加密切相關.結論:天花粉蛋白對黑色素瘤B-16細胞DNA具有較彊損傷作用,可誘導其髮生凋亡;天花粉蛋白誘導凋亡可能與細胞內鈣、ROS和NO的增加有關.
목적:연구천화분단백(TCS)대흑색소류B-16세포적작용,탐토천화분단백항종류적궤제.방법:(1)응용단세포전영급Hoechst33258염핵형태관찰래연구TCS대흑색소류B-16세포손상작용.(2)응용격광공취초소묘현미술결합특이성형광탐침Fluo-3/AM、H2 DCF-DA화DAF-FM diacetate관찰재TCS작용하,단개류세포내개리자(Ca2+)、-양화담(NO)화활성양(ROS)적신호동태변화,병탐토세포내ROS화NO적증가여개리자적관계.결과:(1)종농도50mg/L TCS부육3 h、6 h후,단세포전영、Hoechst33258염색적핵형태관찰미발현여대조조유명현구별;부육12 h후단세포전영가견DNA손상적특정성현상-혜성미파;Hoechst33258염색적핵형태관찰발현유명현적핵농축화변집현상,출현특정성조망소체.(2)종농도50 mg/L적TCS가인기세포내Ca2+、NO화ROS적생성량명현고우대조조(P＜0.01).세포내ROS화NO적증가여개리자적증가밀절상관.결론:천화분단백대흑색소류B-16세포DNA구유교강손상작용,가유도기발생조망;천화분단백유도조망가능여세포내개、ROS화NO적증가유관.
