中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
10期
87-92
,共6页
甘蔗%PPDK基因%LA-PCR技术%全长DNA克隆
甘蔗%PPDK基因%LA-PCR技術%全長DNA剋隆
감자%PPDK기인%LA-PCR기술%전장DNA극륭
和C3植物相比,C4植物具有明显的生长优势及水分和营养利用率,生物产量也较高.甘蔗是典型的C4作物之一.以甘蔗叶片提取的基因组DNA为模板,以GenBank公布的甘蔗PPDK基因cDNA序列设计引物,进行LA-PCR(Long Acute PCR)扩增.将PCR产物克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109,测序,得到了13.5kb的甘蔗全长PPDK基因序列.为方便后续实验,在引物中引入可利用的XhoⅠ和NotI酶切位点,将全长PPDK基因分两段克隆到pMD18-T Simple载体中,转化大肠杆菌JM109,完成了甘蔗全长丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)基因的完整克隆,为将其导入C3作物中奠定了研究基础.
和C3植物相比,C4植物具有明顯的生長優勢及水分和營養利用率,生物產量也較高.甘蔗是典型的C4作物之一.以甘蔗葉片提取的基因組DNA為模闆,以GenBank公佈的甘蔗PPDK基因cDNA序列設計引物,進行LA-PCR(Long Acute PCR)擴增.將PCR產物剋隆到pMD18-T載體中,轉化大腸桿菌JM109,測序,得到瞭13.5kb的甘蔗全長PPDK基因序列.為方便後續實驗,在引物中引入可利用的XhoⅠ和NotI酶切位點,將全長PPDK基因分兩段剋隆到pMD18-T Simple載體中,轉化大腸桿菌JM109,完成瞭甘蔗全長丙酮痠燐痠二激酶(PPDK)基因的完整剋隆,為將其導入C3作物中奠定瞭研究基礎.
화C3식물상비,C4식물구유명현적생장우세급수분화영양이용솔,생물산량야교고.감자시전형적C4작물지일.이감자협편제취적기인조DNA위모판,이GenBank공포적감자PPDK기인cDNA서렬설계인물,진행LA-PCR(Long Acute PCR)확증.장PCR산물극륭도pMD18-T재체중,전화대장간균JM109,측서,득도료13.5kb적감자전장PPDK기인서렬.위방편후속실험,재인물중인입가이용적XhoⅠ화NotI매절위점,장전장PPDK기인분량단극륭도pMD18-T Simple재체중,전화대장간균JM109,완성료감자전장병동산린산이격매(PPDK)기인적완정극륭,위장기도입C3작물중전정료연구기출.