高效缺氧诱导表达载体的构建与鉴定
고효결양유도표체재체적구건여감정
Construction and Identification of an Effective Hypoxia-Inducible Expression Vector
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2008年 2期 191-193 ,共3页

    张翔%杨洁%丁蓉%陈锐%杜德伟%李占亭%赵晶%杨安钢%孙脊峰

    장상%양길%정용%진예%두덕위%리점정%조정%양안강%손척봉

    缺氧应答元件%最小CMV启动子%报告基因%缺氧诱导表达 缺氧應答元件%最小CMV啟動子%報告基因%缺氧誘導錶達
    결양응답원건%최소CMV계동자%보고기인%결양유도표체
    目的:构建缺氧诱导表达载体,以介导报告基因在缺氧环境下的特异、高效表达.方法:通过分子生物学方法,将鼠磷酸甘油酸激酶基因的缺氧应答元件(HRE)和最小CMV(mCMV)启动子重组,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或萤光素酶报告基因的可诱导载体;通过酶切鉴定和测序分析,证实载体获得正确的构建;将重组载体转染HeLa细胞,观察EGFP荧光强度并检测萤光素酶活性.结果:HRE/mCMV启动子调控的报告基因载体具有特异和高效的诱导活性.结论:构建了可以进行特异和高效缺氧诱导的报告基因载体,为其进一步的开发和应用奠定了实验基础.
    목적:구건결양유도표체재체,이개도보고기인재결양배경하적특이、고효표체.방법:통과분자생물학방법,장서린산감유산격매기인적결양응답원건(HRE)화최소CMV(mCMV)계동자중조,구건증강형록색형광단백(EGFP)혹형광소매보고기인적가유도재체;통과매절감정화측서분석,증실재체획득정학적구건;장중조재체전염HeLa세포,관찰EGFP형광강도병검측형광소매활성.결과:HRE/mCMV계동자조공적보고기인재체구유특이화고효적유도활성.결론:구건료가이진행특이화고효결양유도적보고기인재체,위기진일보적개발화응용전정료실험기출.
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