CAJ | 학술논문

根据GenBank中桃拉病毒的全基因组序列,分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因vp1、vp2、vp3的相应引物,以发病的凡纳滨对虾中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增,分别获得分子量为1 164、849、507 bp的基因片段,与预期一致.再将目的基因与pET-28a载体连接,分别构建重组表达载体pET-VP1、pET-VP2和pET-VP3,重组子经酶切和测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测.SDS-PAGE电泳的结果表明,在37℃下,0.5mmol/dm3的IPTG诱导表达的重组蛋白均以包涵体的形式存在,重组蛋白VP1、VP2、VP3的大小分别为48、36、24 KDa.本研究的结果为制备桃拉病毒主要结构蛋白的特异性抗体,进而研制桃拉病毒快速检测试剂盒奠定了基础.
근거GenBank중도랍병독적전기인조서렬,분별설계확증해병독주요결구단백기인vp1、vp2、vp3적상응인물,이발병적범납빈대하중제취적총RNA위모판,이용RT-PCR기술대목적기인진행료확증,분별획득분자량위1 164、849、507 bp적기인편단,여예기일치.재장목적기인여pET-28a재체련접,분별구건중조표체재체pET-VP1、pET-VP2화pET-VP3,중조자경매절화측서감정후도입대장간균BL21(DE3),IPTG유도표체후진행SDS-PAGE검측.SDS-PAGE전영적결과표명,재37℃하,0.5mmol/dm3적IPTG유도표체적중조단백균이포함체적형식존재,중조단백VP1、VP2、VP3적대소분별위48、36、24 KDa.본연구적결과위제비도랍병독주요결구단백적특이성항체,진이연제도랍병독쾌속검측시제합전정료기출.