CAJ | 학술논문

以苦瓜籽为材料,研究了聚丙烯酸分离纯化苦瓜种仁碱性蛋白的方法及影响因素.等电点沉淀试验表明,柠檬酸、盐酸分别调节苦瓜种仁粗提液pH至6.0、4.0时,各有14.62%和32.49%的苦瓜种仁蛋白被沉淀.醋酸的等电,最沉淀作用呈现阶段性特点,pH 6.0和4.0时分别有26.17%和38.72%的苦瓜种仁蛋白被沉淀.醋酸、盐酸和柠檬酸处理的1mL苦瓜种仁粗提液(pH 4.0),1%PAA选择性沉淀碱性蛋白(等电点pI为8.65～9.30)的最佳用量分别为100μL、120μL和100μL.醋酸调节苦瓜种仁粗提液pH分别至5.0、4.0和3.0,等电点沉淀后的上清液用PAA沉淀碱性蛋白,当PAA(1%)用量为160μL/mL提取液时,pH5.0和3.0样液分别有33.77%和43.56%蛋白质被沉淀;当PAA用量为120μL/mL提取液时,pH 4.0样液中30.83%蛋白质被沉淀.PAA-蛋白质复合物溶解于碱性溶液(pH》9.0),当溶液NaCl浓度为3.0%时,溶液蛋白质浓度最高.PAA选择性沉淀的苦瓜种仁碱性蛋白经Sephadex G-75柱层析分离,分别在175min和300min出现主峰I和Ⅱ.SDS-PAGE和IEF分析表明主峰I的分子量约为30kD,pI值约为9.5,主峰Ⅱ的分子量约为10kD,pI值约为9.3.
이고과자위재료,연구료취병희산분리순화고과충인감성단백적방법급영향인소.등전점침정시험표명,저몽산、염산분별조절고과충인조제액pH지6.0、4.0시,각유14.62%화32.49%적고과충인단백피침정.작산적등전,최침정작용정현계단성특점,pH 6.0화4.0시분별유26.17%화38.72%적고과충인단백피침정.작산、염산화저몽산처리적1mL고과충인조제액(pH 4.0),1%PAA선택성침정감성단백(등전점pI위8.65～9.30)적최가용량분별위100μL、120μL화100μL.작산조절고과충인조제액pH분별지5.0、4.0화3.0,등전점침정후적상청액용PAA침정감성단백,당PAA(1%)용량위160μL/mL제취액시,pH5.0화3.0양액분별유33.77%화43.56%단백질피침정;당PAA용량위120μL/mL제취액시,pH 4.0양액중30.83%단백질피침정.PAA-단백질복합물용해우감성용액(pH》9.0),당용액NaCl농도위3.0%시,용액단백질농도최고.PAA선택성침정적고과충인감성단백경Sephadex G-75주층석분리,분별재175min화300min출현주봉I화Ⅱ.SDS-PAGE화IEF분석표명주봉I적분자량약위30kD,pI치약위9.5,주봉Ⅱ적분자량약위10kD,pI치약위9.3.