CAJ | 학술논문

为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测.结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制.连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc.
위건립일충기우단백질착오절첩순배확증(PMCA)적체외은정확증방법이관찰PrPSc시부능재체외련속전대,아문분별제비료정상창서화양소양병인자263K감염적발병창서적전뇌균장,장량충뇌균장이불동체적비혼합후,분별진행144개순배적직접PMCA화매륜48개순배、공8륜적련속PMCA,용Western blot대PrPSc적확증정황진행검측.결과현시,여상규적직접PMCA방법상비,련속PMCA능경유효지사저농도적PrPSc확증도가검출적수평,표명련속PMCA가이지지양소양인자263K재체외장기은정적복제.련속PMCA방법시일충체외고효지확증PrPSc적방법,유잠력성위일충Prion체외배양방법,용우연구Prion착오절첩화복제궤제,이급검측뇌조직、외주조직화체액양품중적미량PrPSc.