中国油料作物学报
中國油料作物學報
중국유료작물학보
CHINESE JOURNAL OF OIL CROP SCIENCES
2007年
2期
152-156
,共5页
蔡宁波%潘建菁%黄湘文%庄伟建
蔡寧波%潘建菁%黃湘文%莊偉建
채저파%반건정%황상문%장위건
花生果皮%cDNA文库%抑制消减杂交
花生果皮%cDNA文庫%抑製消減雜交
화생과피%cDNA문고%억제소감잡교
为构建花生果皮差异表达基因消减文库,分离花生果皮差异表达cDNA片段,本研究采用抑制消减杂交技术,以花生种仁cDNA为Driver,果皮cDNA为Tester,进行两次消减杂交和两次抑制性PCR,将第二次PCR产物与pGEM-TEasy载体相连,电击转化大肠杆菌,成功构建果皮差异表达cDNA文库.所长出菌落中89.2%为白色克隆.采用PCR法对重组子进行鉴定,发现其中单一扩增条带的克隆约占83.5%,片段大小集中分布于250～750bp之间.
為構建花生果皮差異錶達基因消減文庫,分離花生果皮差異錶達cDNA片段,本研究採用抑製消減雜交技術,以花生種仁cDNA為Driver,果皮cDNA為Tester,進行兩次消減雜交和兩次抑製性PCR,將第二次PCR產物與pGEM-TEasy載體相連,電擊轉化大腸桿菌,成功構建果皮差異錶達cDNA文庫.所長齣菌落中89.2%為白色剋隆.採用PCR法對重組子進行鑒定,髮現其中單一擴增條帶的剋隆約佔83.5%,片段大小集中分佈于250～750bp之間.
위구건화생과피차이표체기인소감문고,분리화생과피차이표체cDNA편단,본연구채용억제소감잡교기술,이화생충인cDNA위Driver,과피cDNA위Tester,진행량차소감잡교화량차억제성PCR,장제이차PCR산물여pGEM-TEasy재체상련,전격전화대장간균,성공구건과피차이표체cDNA문고.소장출균락중89.2%위백색극륭.채용PCR법대중조자진행감정,발현기중단일확증조대적극륭약점83.5%,편단대소집중분포우250～750bp지간.
