CAJ | 학술논문

背景与目的:CD40与CD40配体(CD40L)间的结合反应可以启动体液和细胞免疫应答,在宿主抗肿瘤免疫反应中起着重要作用.然而,一些肿瘤细胞如表达CD40L的卵巢癌细胞与宿主相互作用的分子机制仍不十分清楚.本文旨在探讨转染CD40L cDNA的小鼠卵巢癌细胞株OVHM(CD40L/OVHM)的生物学特性及抗肿瘤效应.方法:用脂质体转染法将CD40L cDNA转入OVHM细胞,流式细胞技术检测CD40L/OVHM和OVHM细胞中CD40、CD40L、MHC-I、MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达水平.MTT法检测CD40L/OVHM和OVHM细胞的增殖反应.将OVHM或CD40L/OVHM细胞皮下接种6～8周龄的C57BL/6N×C3H/He杂交一代(B6C3F1)小鼠和BALB/c裸鼠,观察肿瘤的生长情况.ELISA法测定皮下接种OVHM或CD40L/OVHM细胞小鼠脾细胞和经放射线照射的OVHM细胞培养上清中IFN-γ释放量.结果:与亲本OVHM细胞相比,转染CD40L cDNA的CD40L/OVHM细胞CD40L表达明显升高(P＜0.05),CD40、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达无明显变化,共刺激分子CD80、CD86的表达明显增强(P＜0.05);转染和未转染CD40L的OVHM细胞增殖无显著性差异.接种CD40L/OVHM细胞的小鼠,肿瘤的生长速度与接种OVHM小鼠相比明显减慢,且无腹腔转移结节,大部分小鼠无肿瘤细胞生长.再次于接种CD40L/OVHM细胞的小鼠对侧皮下接种OVHM细胞(2×105),则无肿瘤生长.将接种CD40L/OVHM的小鼠脾细胞和经放射线照射的OVHM细胞体外混合培养,分泌IFN-γ的水平[(1802±187.7)pg/ml]明显高于接种OVHM细胞和未接种肿瘤细胞的小鼠脾细胞所分泌的IFN-γ量[(20.3±7.9)pg/ml、(100.3±19.9)pg/ml].结论:转染CD40L基因可提高OVHM细胞的抗原性,引起较强的特异性细胞毒T淋巴细胞抗肿瘤免疫.
배경여목적:CD40여CD40배체(CD40L)간적결합반응가이계동체액화세포면역응답,재숙주항종류면역반응중기착중요작용.연이,일사종류세포여표체CD40L적란소암세포여숙주상호작용적분자궤제잉불십분청초.본문지재탐토전염CD40L cDNA적소서란소암세포주OVHM(CD40L/OVHM)적생물학특성급항종류효응.방법:용지질체전염법장CD40L cDNA전입OVHM세포,류식세포기술검측CD40L/OVHM화OVHM세포중CD40、CD40L、MHC-I、MHC-Ⅱ、CD80、CD86적표체수평.MTT법검측CD40L/OVHM화OVHM세포적증식반응.장OVHM혹CD40L/OVHM세포피하접충6～8주령적C57BL/6N×C3H/He잡교일대(B6C3F1)소서화BALB/c라서,관찰종류적생장정황.ELISA법측정피하접충OVHM혹CD40L/OVHM세포소서비세포화경방사선조사적OVHM세포배양상청중IFN-γ석방량.결과:여친본OVHM세포상비,전염CD40L cDNA적CD40L/OVHM세포CD40L표체명현승고(P＜0.05),CD40、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ적표체무명현변화,공자격분자CD80、CD86적표체명현증강(P＜0.05);전염화미전염CD40L적OVHM세포증식무현저성차이.접충CD40L/OVHM세포적소서,종류적생장속도여접충OVHM소서상비명현감만,차무복강전이결절,대부분소서무종류세포생장.재차우접충CD40L/OVHM세포적소서대측피하접충OVHM세포(2×105),칙무종류생장.장접충CD40L/OVHM적소서비세포화경방사선조사적OVHM세포체외혼합배양,분비IFN-γ적수평[(1802±187.7)pg/ml]명현고우접충OVHM세포화미접충종류세포적소서비세포소분비적IFN-γ량[(20.3±7.9)pg/ml、(100.3±19.9)pg/ml].결론:전염CD40L기인가제고OVHM세포적항원성,인기교강적특이성세포독T림파세포항종류면역.