科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2006年
4期
18-21
,共4页
师永霞%马文丽%袁美妗%陈建武%庞义
師永霞%馬文麗%袁美妗%陳建武%龐義
사영하%마문려%원미금%진건무%방의
苏云金杆菌%晶体蛋白Cyt1A%营养期杀虫蛋白Vip3A%生物测定
囌雲金桿菌%晶體蛋白Cyt1A%營養期殺蟲蛋白Vip3A%生物測定
소운금간균%정체단백Cyt1A%영양기살충단백Vip3A%생물측정
为检测苏云金杆菌晶体蛋白Cyt1A对Vip3A表达和杀虫活性的影响,将p20和cyt1A基因与vip3A基因连接构建了重组质粒pHVC20,然后电激转化至苏云金杆菌无晶体突变株CryB中进行了共表达,以单独表达Vip3A蛋白的CryB(pHPT3)作为对照菌株.Westem blot结果显示,Vip3A蛋白在CryB(pHVC20)菌株中的最大表达量约为在CryB(pHPT3)菌株的2倍,这可能是由于前者中的辅助蛋白P20增加了Vip3A表达量的缘故,晶体蛋白Cyt1A的存在对Vip3A的正常表达没有影响.生物测定结果表明,CryB(pHVC20)和CryB(pHPT3)菌株对斜纹夜蛾初孵幼虫的LC50值分别为10.62 μg/ml和78 μg/ml,前者的毒力比后者提高了6倍,这表明Cyt1A蛋白和Vip3A蛋白对目标昆虫的毒力可能存在着协同增效作用.
為檢測囌雲金桿菌晶體蛋白Cyt1A對Vip3A錶達和殺蟲活性的影響,將p20和cyt1A基因與vip3A基因連接構建瞭重組質粒pHVC20,然後電激轉化至囌雲金桿菌無晶體突變株CryB中進行瞭共錶達,以單獨錶達Vip3A蛋白的CryB(pHPT3)作為對照菌株.Westem blot結果顯示,Vip3A蛋白在CryB(pHVC20)菌株中的最大錶達量約為在CryB(pHPT3)菌株的2倍,這可能是由于前者中的輔助蛋白P20增加瞭Vip3A錶達量的緣故,晶體蛋白Cyt1A的存在對Vip3A的正常錶達沒有影響.生物測定結果錶明,CryB(pHVC20)和CryB(pHPT3)菌株對斜紋夜蛾初孵幼蟲的LC50值分彆為10.62 μg/ml和78 μg/ml,前者的毒力比後者提高瞭6倍,這錶明Cyt1A蛋白和Vip3A蛋白對目標昆蟲的毒力可能存在著協同增效作用.
위검측소운금간균정체단백Cyt1A대Vip3A표체화살충활성적영향,장p20화cyt1A기인여vip3A기인련접구건료중조질립pHVC20,연후전격전화지소운금간균무정체돌변주CryB중진행료공표체,이단독표체Vip3A단백적CryB(pHPT3)작위대조균주.Westem blot결과현시,Vip3A단백재CryB(pHVC20)균주중적최대표체량약위재CryB(pHPT3)균주적2배,저가능시유우전자중적보조단백P20증가료Vip3A표체량적연고,정체단백Cyt1A적존재대Vip3A적정상표체몰유영향.생물측정결과표명,CryB(pHVC20)화CryB(pHPT3)균주대사문야아초부유충적LC50치분별위10.62 μg/ml화78 μg/ml,전자적독력비후자제고료6배,저표명Cyt1A단백화Vip3A단백대목표곤충적독력가능존재착협동증효작용.
