分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2006年
5期
650-654
,共5页
潘素君%戴良英%刘雄伦%王国梁
潘素君%戴良英%劉雄倫%王國樑
반소군%대량영%류웅륜%왕국량
广谱抗稻瘟病基因Pi9%籼稻%农杆菌介导法%抗性分离
廣譜抗稻瘟病基因Pi9%秈稻%農桿菌介導法%抗性分離
엄보항도온병기인Pi9%선도%농간균개도법%항성분리
通过农杆菌介导法,将由CaMv35s启动子启动的广谱抗稻瘟病基因Pi9转入5个籼稻品种(丰源B、湘晚籼13号、R996、527、1701)的愈伤组织中,所用质粒为pCAMBIA1301,pCAMBIA1301的T-DNA区含有潮霉素(hygmycin)抗性基因和β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因.以潮霉素作为筛选剂对籼稻愈伤组织进行筛选,结果表明,不同品种在转化过程中抗性愈伤率在73.9%~83.3%之间,获得的部分抗性苗经PCR检测为阳性,阳性植株的转化率差异显著,其转化率为5.7%~25.9%之间,对获得的抗性苗和T2代幼苗的根和叶进行GUS组织化学染色分析,有些抗性苗和T2代幼苗的根和叶呈蓝色反应,表明广谱抗稻瘟病基因Pi9基因已整合到水稻基因组并能正常表达.对T2代进行稻瘟病小种接种试验,结果显示了抗性分离.并且建立了一套较为有效的水稻遗传转化体系.
通過農桿菌介導法,將由CaMv35s啟動子啟動的廣譜抗稻瘟病基因Pi9轉入5箇秈稻品種(豐源B、湘晚秈13號、R996、527、1701)的愈傷組織中,所用質粒為pCAMBIA1301,pCAMBIA1301的T-DNA區含有潮黴素(hygmycin)抗性基因和β-葡萄糖苷痠酶(GUS)基因.以潮黴素作為篩選劑對秈稻愈傷組織進行篩選,結果錶明,不同品種在轉化過程中抗性愈傷率在73.9%~83.3%之間,穫得的部分抗性苗經PCR檢測為暘性,暘性植株的轉化率差異顯著,其轉化率為5.7%~25.9%之間,對穫得的抗性苗和T2代幼苗的根和葉進行GUS組織化學染色分析,有些抗性苗和T2代幼苗的根和葉呈藍色反應,錶明廣譜抗稻瘟病基因Pi9基因已整閤到水稻基因組併能正常錶達.對T2代進行稻瘟病小種接種試驗,結果顯示瞭抗性分離.併且建立瞭一套較為有效的水稻遺傳轉化體繫.
통과농간균개도법,장유CaMv35s계동자계동적엄보항도온병기인Pi9전입5개선도품충(봉원B、상만선13호、R996、527、1701)적유상조직중,소용질립위pCAMBIA1301,pCAMBIA1301적T-DNA구함유조매소(hygmycin)항성기인화β-포도당감산매(GUS)기인.이조매소작위사선제대선도유상조직진행사선,결과표명,불동품충재전화과정중항성유상솔재73.9%~83.3%지간,획득적부분항성묘경PCR검측위양성,양성식주적전화솔차이현저,기전화솔위5.7%~25.9%지간,대획득적항성묘화T2대유묘적근화협진행GUS조직화학염색분석,유사항성묘화T2대유묘적근화협정람색반응,표명엄보항도온병기인Pi9기인이정합도수도기인조병능정상표체.대T2대진행도온병소충접충시험,결과현시료항성분리.병차건립료일투교위유효적수도유전전화체계.