中国沙漠
中國沙漠
중국사막
JOURNAL OF DESERT RESEARCH
2006年
2期
286-290
,共5页
郝瑞文%景建洲%李振勇%贾敬芬
郝瑞文%景建洲%李振勇%賈敬芬
학서문%경건주%리진용%가경분
霸王%RAPD%PCR%条件优化
霸王%RAPD%PCR%條件優化
패왕%RAPD%PCR%조건우화
实验以霸王20 d龄无菌籽苗为材料,使用CTAB法提取其基因组DNA,进行RAPD条件优化分析.通过单因子实验分别研究了Mg2+浓度、dNTPS浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对RAPD反应的影响,即在25 μL总反应体系中,Mg2+的适宜浓度为1.5～2.5 mmol·L -1 、dNTPs的适宜浓度为0.2～0.3 mmol·L -1 、随机引物的浓度以1.2 μmol·L -1 为宜、Taq酶的用量以2.0 U为佳、模板DNA的最适用量为50 ng.本研究的PCR扩增程序为94℃预变性8 min, 94℃变性1 min, 37℃退火1 min, 72℃延伸2 min,设40个循环,最后72℃保温6 min.
實驗以霸王20 d齡無菌籽苗為材料,使用CTAB法提取其基因組DNA,進行RAPD條件優化分析.通過單因子實驗分彆研究瞭Mg2+濃度、dNTPS濃度、Taq酶的濃度、引物濃度和模闆DNA濃度對RAPD反應的影響,即在25 μL總反應體繫中,Mg2+的適宜濃度為1.5～2.5 mmol·L -1 、dNTPs的適宜濃度為0.2～0.3 mmol·L -1 、隨機引物的濃度以1.2 μmol·L -1 為宜、Taq酶的用量以2.0 U為佳、模闆DNA的最適用量為50 ng.本研究的PCR擴增程序為94℃預變性8 min, 94℃變性1 min, 37℃退火1 min, 72℃延伸2 min,設40箇循環,最後72℃保溫6 min.
실험이패왕20 d령무균자묘위재료,사용CTAB법제취기기인조DNA,진행RAPD조건우화분석.통과단인자실험분별연구료Mg2+농도、dNTPS농도、Taq매적농도、인물농도화모판DNA농도대RAPD반응적영향,즉재25 μL총반응체계중,Mg2+적괄의농도위1.5～2.5 mmol·L -1 、dNTPs적괄의농도위0.2～0.3 mmol·L -1 、수궤인물적농도이1.2 μmol·L -1 위의、Taq매적용량이2.0 U위가、모판DNA적최괄용량위50 ng.본연구적PCR확증정서위94℃예변성8 min, 94℃변성1 min, 37℃퇴화1 min, 72℃연신2 min,설40개순배,최후72℃보온6 min.
