四川大学学报(自然科学版)
四川大學學報(自然科學版)
사천대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
2期
420-424
,共5页
刘运强%陶大昌%张思仲%马用信
劉運彊%陶大昌%張思仲%馬用信
류운강%도대창%장사중%마용신
小鼠Znf230基因%启动子%调控因子%表达载体
小鼠Znf230基因%啟動子%調控因子%錶達載體
소서Znf230기인%계동자%조공인자%표체재체
通过PCR扩增和限制性内切酶酶切克隆,获得1990bp的小鼠Znf230基因上游序列,经序列测定和P-Match软件分析,发现该段序列中可能含有2个CAAT-box、若干个性别决定因子Sry、Sox5、Sox30,以及数个参与胚胎期器官发生的基因HoxA3、Pax2、En1等的结合位点.为了研究此段序列的调控功能,构建了该段序列与lacZ基因融合的表达载体pMZnf230proLacZ.然后通过转染HeLa和NIH3T3细胞,发现pMZnf230pro-LacZ载体在两种细胞中都表达β-半乳糖苷酶,说明此段序列具有启动子功能.
通過PCR擴增和限製性內切酶酶切剋隆,穫得1990bp的小鼠Znf230基因上遊序列,經序列測定和P-Match軟件分析,髮現該段序列中可能含有2箇CAAT-box、若榦箇性彆決定因子Sry、Sox5、Sox30,以及數箇參與胚胎期器官髮生的基因HoxA3、Pax2、En1等的結閤位點.為瞭研究此段序列的調控功能,構建瞭該段序列與lacZ基因融閤的錶達載體pMZnf230proLacZ.然後通過轉染HeLa和NIH3T3細胞,髮現pMZnf230pro-LacZ載體在兩種細胞中都錶達β-半乳糖苷酶,說明此段序列具有啟動子功能.
통과PCR확증화한제성내절매매절극륭,획득1990bp적소서Znf230기인상유서렬,경서렬측정화P-Match연건분석,발현해단서렬중가능함유2개CAAT-box、약간개성별결정인자Sry、Sox5、Sox30,이급수개삼여배태기기관발생적기인HoxA3、Pax2、En1등적결합위점.위료연구차단서렬적조공공능,구건료해단서렬여lacZ기인융합적표체재체pMZnf230proLacZ.연후통과전염HeLa화NIH3T3세포,발현pMZnf230pro-LacZ재체재량충세포중도표체β-반유당감매,설명차단서렬구유계동자공능.