中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2005年
10期
1873-1878
,共6页
李林昊%吴立军%田代真一%小野寺敏%内海文彰%池岛乔
李林昊%吳立軍%田代真一%小野寺敏%內海文彰%池島喬
리림호%오립군%전대진일%소야사민%내해문창%지도교
紫外线%A375-S2细胞%水飞蓟素%细胞凋亡%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
紫外線%A375-S2細胞%水飛薊素%細胞凋亡%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶
자외선%A375-S2세포%수비계소%세포조망%반광안산천동안산단백매
目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体.方法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl-2,Bcl-Xl和Bax)的表达.结果:紫外线照射(2.4 J/cm2,5min)能显著诱导A375-S2细胞发生凋亡,其作用呈明显时间依赖性.形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;水飞蓟素具有抑制紫外线照射(2.4 J/cm2,5 min)诱导A375-S2细胞凋亡的作用,水飞蓟素作用于紫外线照射(2.4 J/cm2,5 min)的A375-S2细胞,培养12 h,使紫外线照射诱导的半胱天冬酶-9、半胱天冬酶-3的活力降低;免疫印记法检测发现水飞蓟素作用的A375-S2细胞(紫外线照射)中Bcl-2 蛋白和Bcl-Xl蛋白的表达增加.结论:水飞蓟素明显抑制紫外线照射诱导的A375-S2细胞的凋亡,其抑制凋亡作用与半胱天冬酶途径和线粒体途径相关.
目的:從天然藥物中篩選齣抑製紫外線照射誘導人黑色素瘤細胞A375-S2凋亡的有效單體.方法:MTT法測定細胞生長抑製率;形態學觀察,DNA凝膠電泳及LDH法;用半胱天鼕酶活力檢測試劑盒測定半胱天鼕酶活力;用免疫印記法檢測Bcl-2傢族成員(Bcl-2,Bcl-Xl和Bax)的錶達.結果:紫外線照射(2.4 J/cm2,5min)能顯著誘導A375-S2細胞髮生凋亡,其作用呈明顯時間依賴性.形態學觀察可見凋亡小體的形成,瓊脂糖凝膠電泳可見凋亡典型的DNA梯帶;水飛薊素具有抑製紫外線照射(2.4 J/cm2,5 min)誘導A375-S2細胞凋亡的作用,水飛薊素作用于紫外線照射(2.4 J/cm2,5 min)的A375-S2細胞,培養12 h,使紫外線照射誘導的半胱天鼕酶-9、半胱天鼕酶-3的活力降低;免疫印記法檢測髮現水飛薊素作用的A375-S2細胞(紫外線照射)中Bcl-2 蛋白和Bcl-Xl蛋白的錶達增加.結論:水飛薊素明顯抑製紫外線照射誘導的A375-S2細胞的凋亡,其抑製凋亡作用與半胱天鼕酶途徑和線粒體途徑相關.
목적:종천연약물중사선출억제자외선조사유도인흑색소류세포A375-S2조망적유효단체.방법:MTT법측정세포생장억제솔;형태학관찰,DNA응효전영급LDH법;용반광천동매활력검측시제합측정반광천동매활력;용면역인기법검측Bcl-2가족성원(Bcl-2,Bcl-Xl화Bax)적표체.결과:자외선조사(2.4 J/cm2,5min)능현저유도A375-S2세포발생조망,기작용정명현시간의뢰성.형태학관찰가견조망소체적형성,경지당응효전영가견조망전형적DNA제대;수비계소구유억제자외선조사(2.4 J/cm2,5 min)유도A375-S2세포조망적작용,수비계소작용우자외선조사(2.4 J/cm2,5 min)적A375-S2세포,배양12 h,사자외선조사유도적반광천동매-9、반광천동매-3적활력강저;면역인기법검측발현수비계소작용적A375-S2세포(자외선조사)중Bcl-2 단백화Bcl-Xl단백적표체증가.결론:수비계소명현억제자외선조사유도적A375-S2세포적조망,기억제조망작용여반광천동매도경화선립체도경상관.