浙江工业大学学报
浙江工業大學學報
절강공업대학학보
Journal of Zhejiang University of Technology
2008年
6期
633-637
,共5页
马杭圣%王鸿%孙汉栋%易喻%应国清
馬杭聖%王鴻%孫漢棟%易喻%應國清
마항골%왕홍%손한동%역유%응국청
抗CD3单克隆抗体%聚乙二醇%化学修饰%免疫活性
抗CD3單剋隆抗體%聚乙二醇%化學脩飾%免疫活性
항CD3단극륭항체%취을이순%화학수식%면역활성
确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体和抗体片段的制备工艺路线.以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活性.较佳的修饰工艺条件为:在pH9.0硼酸缓冲液,反应温度25 ℃,抗体浓度0.2 mg/mL,抗体和聚乙二醇摩尔比为1:20,反应3 h.修饰后抗CD3单抗全抗,对T淋巴细胞增殖抑制活性下降了32.28%,抗体Fab′下降了7.96%,PEG化Fab′下降了19.92%.利用聚乙二醇修饰抗体和抗体片段,提高了抗体半衰期,且无细胞毒性,活性损失较小,该技术具有较高的可行性,可极大的提高单克隆抗体尤其是非人源性抗体在临床上的应用.
確定一條聚乙二醇化鼠抗人CD3單剋隆抗體和抗體片段的製備工藝路線.以胃蛋白酶酶解併通過凝膠柱分離和純化得到抗體Fab′,利用PEG-SPA脩飾抗體和抗體片段Fab′上的氨基,通過體內和體外T細胞增殖實驗,攷查脩飾後的抗體和抗體片段的免疫活性.較佳的脩飾工藝條件為:在pH9.0硼痠緩遲液,反應溫度25 ℃,抗體濃度0.2 mg/mL,抗體和聚乙二醇摩爾比為1:20,反應3 h.脩飾後抗CD3單抗全抗,對T淋巴細胞增殖抑製活性下降瞭32.28%,抗體Fab′下降瞭7.96%,PEG化Fab′下降瞭19.92%.利用聚乙二醇脩飾抗體和抗體片段,提高瞭抗體半衰期,且無細胞毒性,活性損失較小,該技術具有較高的可行性,可極大的提高單剋隆抗體尤其是非人源性抗體在臨床上的應用.
학정일조취을이순화서항인CD3단극륭항체화항체편단적제비공예로선.이위단백매매해병통과응효주분리화순화득도항체Fab′,이용PEG-SPA수식항체화항체편단Fab′상적안기,통과체내화체외T세포증식실험,고사수식후적항체화항체편단적면역활성.교가적수식공예조건위:재pH9.0붕산완충액,반응온도25 ℃,항체농도0.2 mg/mL,항체화취을이순마이비위1:20,반응3 h.수식후항CD3단항전항,대T림파세포증식억제활성하강료32.28%,항체Fab′하강료7.96%,PEG화Fab′하강료19.92%.이용취을이순수식항체화항체편단,제고료항체반쇠기,차무세포독성,활성손실교소,해기술구유교고적가행성,가겁대적제고단극륭항체우기시비인원성항체재림상상적응용.
