中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2005年
6期
631-634
,共4页
陈贤璟%丘少鹏%毛晓鹏%王杜渐%黎明涛
陳賢璟%丘少鵬%毛曉鵬%王杜漸%黎明濤
진현경%구소붕%모효붕%왕두점%려명도
PSMA%酿酒酵母%基因表达%前列腺癌
PSMA%釀酒酵母%基因錶達%前列腺癌
PSMA%양주효모%기인표체%전렬선암
[目的]分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)基因片段在酿酒酵母中的诱导表达情况,以便进一步探讨重组人PSMA的免疫活性并完成抗前列腺癌PSMA蛋白疫苗的制备.[方法]应用基因重组技术将人PSMAcDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NT,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NT-PSMA,转化酿酒酵母菌株INVSc1,尿嘧啶筛选出阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Western blot检测.[结果]成功构建了PSMA的酵母真核表达重组子pYES2/NT-PSMA,并在酿酒酵母INVSc1中得到有效表达,Western blot显示两个特异性的人重组PSMA全蛋白片段,相对分子质量分别为Mr=100×103及Mr=85×103.[结论]人PSMA基因片段能够在酿酒酵母中表达并进行翻译后糖基化修饰,为下一步进行抗前列腺癌PSMA疫苗的研制奠定了良好基础.
[目的]分析前列腺特異性膜抗原(PSMA)基因片段在釀酒酵母中的誘導錶達情況,以便進一步探討重組人PSMA的免疫活性併完成抗前列腺癌PSMA蛋白疫苗的製備.[方法]應用基因重組技術將人PSMAcDNA序列剋隆入釀酒酵母穿梭誘導錶達載體pYES2/NT,構建重組酵母真覈錶達質粒pYES2/NT-PSMA,轉化釀酒酵母菌株INVSc1,尿嘧啶篩選齣暘性剋隆轉化子,經半乳糖誘導錶達後進行菌體全蛋白的Western blot檢測.[結果]成功構建瞭PSMA的酵母真覈錶達重組子pYES2/NT-PSMA,併在釀酒酵母INVSc1中得到有效錶達,Western blot顯示兩箇特異性的人重組PSMA全蛋白片段,相對分子質量分彆為Mr=100×103及Mr=85×103.[結論]人PSMA基因片段能夠在釀酒酵母中錶達併進行翻譯後糖基化脩飾,為下一步進行抗前列腺癌PSMA疫苗的研製奠定瞭良好基礎.
[목적]분석전렬선특이성막항원(PSMA)기인편단재양주효모중적유도표체정황,이편진일보탐토중조인PSMA적면역활성병완성항전렬선암PSMA단백역묘적제비.[방법]응용기인중조기술장인PSMAcDNA서렬극륭입양주효모천사유도표체재체pYES2/NT,구건중조효모진핵표체질립pYES2/NT-PSMA,전화양주효모균주INVSc1,뇨밀정사선출양성극륭전화자,경반유당유도표체후진행균체전단백적Western blot검측.[결과]성공구건료PSMA적효모진핵표체중조자pYES2/NT-PSMA,병재양주효모INVSc1중득도유효표체,Western blot현시량개특이성적인중조PSMA전단백편단,상대분자질량분별위Mr=100×103급Mr=85×103.[결론]인PSMA기인편단능구재양주효모중표체병진행번역후당기화수식,위하일보진행항전렬선암PSMA역묘적연제전정료량호기출.