免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2005年
6期
532-534,539
,共4页
张淑敏%畅继武%随志方%李振莉%马富玲%王馨
張淑敏%暢繼武%隨誌方%李振莉%馬富玲%王馨
장숙민%창계무%수지방%리진리%마부령%왕형
GPI-B7-1%CHO/DHFR-细胞%真核表达
GPI-B7-1%CHO/DHFR-細胞%真覈錶達
GPI-B7-1%CHO/DHFR-세포%진핵표체
目的建立稳定表达糖基化磷脂酰肌醇锚定型人B7-1(GPI-B7-1)的CHO/DHFR-细胞表达体系.方法用Lipofectin介导法将真核细胞高效表达载体pCDNA3-GPI-B7-1和pSV40-DHFR共转染CHO/DHFR-细胞,经免疫荧光流式细胞术检测,并提取膜蛋白进行Westen blot检测.结果经G418筛选和MTX加压扩增,获得高效表达目的蛋白的细胞株.膜蛋白经Western Blot检测具有生物活性.结论 GPI-B7-1在CHO/DHFR-细胞中高效表达,为临床应用与研究奠定了基础.
目的建立穩定錶達糖基化燐脂酰肌醇錨定型人B7-1(GPI-B7-1)的CHO/DHFR-細胞錶達體繫.方法用Lipofectin介導法將真覈細胞高效錶達載體pCDNA3-GPI-B7-1和pSV40-DHFR共轉染CHO/DHFR-細胞,經免疫熒光流式細胞術檢測,併提取膜蛋白進行Westen blot檢測.結果經G418篩選和MTX加壓擴增,穫得高效錶達目的蛋白的細胞株.膜蛋白經Western Blot檢測具有生物活性.結論 GPI-B7-1在CHO/DHFR-細胞中高效錶達,為臨床應用與研究奠定瞭基礎.
목적건립은정표체당기화린지선기순묘정형인B7-1(GPI-B7-1)적CHO/DHFR-세포표체체계.방법용Lipofectin개도법장진핵세포고효표체재체pCDNA3-GPI-B7-1화pSV40-DHFR공전염CHO/DHFR-세포,경면역형광류식세포술검측,병제취막단백진행Westen blot검측.결과경G418사선화MTX가압확증,획득고효표체목적단백적세포주.막단백경Western Blot검측구유생물활성.결론 GPI-B7-1재CHO/DHFR-세포중고효표체,위림상응용여연구전정료기출.