CAJ | 학술논문

目的: 筛选老年性白内障与正常晶体上皮细胞的差异表达基因.方法: 利用改良消减杂交法获得差异cDNA,利用PCR法扩增其中大片段差异cDNA,将其克隆入质粒载体,通过反向点杂交排除假阳性克隆后,阳性克隆测序与GenBank中的序列进行比较,新序列进行计算机分析.结果: 在文库中随机挑选约600个克隆酶切鉴定,获得≥750 bp片段400个.经反向点杂交,排除假阳性克隆后,共得到阳性克隆150个;测序的50个片段中,有30个已知基因(包括20个功能已知基因、10个序列已知但功能未知基因),3个新序列.新序列中有一个的氨基酸序列与假想的锌指蛋白有45%同源性,可能参与细胞生长调控与代谢.结论: 改良消减杂交法可以快速有效地获得老年性白内障差异表达基因,对稀有基因及新基因的发现与功能鉴定有重要意义.
목적: 사선노년성백내장여정상정체상피세포적차이표체기인.방법: 이용개량소감잡교법획득차이cDNA,이용PCR법확증기중대편단차이cDNA,장기극륭입질립재체,통과반향점잡교배제가양성극륭후,양성극륭측서여GenBank중적서렬진행비교,신서렬진행계산궤분석.결과: 재문고중수궤도선약600개극륭매절감정,획득≥750 bp편단400개.경반향점잡교,배제가양성극륭후,공득도양성극륭150개;측서적50개편단중,유30개이지기인(포괄20개공능이지기인、10개서렬이지단공능미지기인),3개신서렬.신서렬중유일개적안기산서렬여가상적자지단백유45%동원성,가능삼여세포생장조공여대사.결론: 개량소감잡교법가이쾌속유효지획득노년성백내장차이표체기인,대희유기인급신기인적발현여공능감정유중요의의.