细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2003年
4期
409-412
,共4页
李瑶琛%孔令洪%王一理%尚宁宽%耿宜萍%司履生
李瑤琛%孔令洪%王一理%尚寧寬%耿宜萍%司履生
리요침%공령홍%왕일리%상저관%경의평%사리생
人突变体471 TNF-α%蛋白纯化%MTT比色法%生物学活性
人突變體471 TNF-α%蛋白純化%MTT比色法%生物學活性
인돌변체471 TNF-α%단백순화%MTT비색법%생물학활성
目的: 在利用原核表达系统表达重组人突变体471 TNF-α蛋白的基础上, 对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测.方法: 利用最佳发酵和表达条件, 诱导基因重组的人突变体471 TNF-α工程菌表达目的蛋白.收集菌体, 经超声破碎, 分离人突变体471 TNF-α的包涵体, 并观察变性剂及蛋白浓度对蛋白折叠的影响.采用MTT比色法检测并比较人野生型及突变体471 TNF-α的生物学活性.结果: 在适当的变性与复性条件下, 已成功地将突变体471 TNF-α折叠并聚合形成具有生物学活性的三聚体.突变体471 TNF-α对L929的细胞毒活性高于野生型TNF-α的15倍.结论: 原核表达系统中表达的人突变体471 TNF-α经复性处理后具有显著的生物学活性, 为进一步进行动物实验及临床研究奠定了基础.
目的: 在利用原覈錶達繫統錶達重組人突變體471 TNF-α蛋白的基礎上, 對該蛋白進行初步純化及生物學活性檢測.方法: 利用最佳髮酵和錶達條件, 誘導基因重組的人突變體471 TNF-α工程菌錶達目的蛋白.收集菌體, 經超聲破碎, 分離人突變體471 TNF-α的包涵體, 併觀察變性劑及蛋白濃度對蛋白摺疊的影響.採用MTT比色法檢測併比較人野生型及突變體471 TNF-α的生物學活性.結果: 在適噹的變性與複性條件下, 已成功地將突變體471 TNF-α摺疊併聚閤形成具有生物學活性的三聚體.突變體471 TNF-α對L929的細胞毒活性高于野生型TNF-α的15倍.結論: 原覈錶達繫統中錶達的人突變體471 TNF-α經複性處理後具有顯著的生物學活性, 為進一步進行動物實驗及臨床研究奠定瞭基礎.
목적: 재이용원핵표체계통표체중조인돌변체471 TNF-α단백적기출상, 대해단백진행초보순화급생물학활성검측.방법: 이용최가발효화표체조건, 유도기인중조적인돌변체471 TNF-α공정균표체목적단백.수집균체, 경초성파쇄, 분리인돌변체471 TNF-α적포함체, 병관찰변성제급단백농도대단백절첩적영향.채용MTT비색법검측병비교인야생형급돌변체471 TNF-α적생물학활성.결과: 재괄당적변성여복성조건하, 이성공지장돌변체471 TNF-α절첩병취합형성구유생물학활성적삼취체.돌변체471 TNF-α대L929적세포독활성고우야생형TNF-α적15배.결론: 원핵표체계통중표체적인돌변체471 TNF-α경복성처리후구유현저적생물학활성, 위진일보진행동물실험급림상연구전정료기출.
