中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
3期
183-186
,共4页
整合素%层粘连蛋白受体%杂交瘤%单克隆抗体
整閤素%層粘連蛋白受體%雜交瘤%單剋隆抗體
정합소%층점련단백수체%잡교류%단극륭항체
目的:制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性.方法:利用整合素α6 cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达GST--整合素α6胞外区融合蛋白.融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定.结果:经ELISA双筛,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1.免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL-7402呈强阳性反应.结论:通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义.
目的:製備針對整閤素α6胞外區的單剋隆抗體併鑒定其生物學特異性.方法:利用整閤素α6 cDNA構建可錶達整閤素α6胞外區的原覈錶達載體,在大腸桿菌中錶達GST--整閤素α6胞外區融閤蛋白.融閤蛋白經凝膠分離純化後免疫Balb/C小鼠,取其脾細胞,用傳統雜交瘤技術與小鼠骨髓瘤細胞融閤及次黃嘌呤、氨基喋呤與胸苷選擇性培養.單剋隆雜交瘤上清經ELISA雙篩後,分析其亞類及進行免疫細胞化學鑒定.結果:經ELISA雙篩,穫得瞭一株能穩定分泌針對整閤素α6胞外區的單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,其分泌抗體亞類為IgG1.免疫細胞化學顯示此單抗在人肝癌細胞繫BEL-7402呈彊暘性反應.結論:通過原覈錶達產物製備併純化瞭針對整閤素α6胞外區的單剋隆抗體,對分離純化α6亞單位、研究其生物學作用及鑒定正常和疾病狀態下是否錶達整閤素α6及其水平具有重要意義.
목적:제비침대정합소α6포외구적단극륭항체병감정기생물학특이성.방법:이용정합소α6 cDNA구건가표체정합소α6포외구적원핵표체재체,재대장간균중표체GST--정합소α6포외구융합단백.융합단백경응효분리순화후면역Balb/C소서,취기비세포,용전통잡교류기술여소서골수류세포융합급차황표령、안기첩령여흉감선택성배양.단극륭잡교류상청경ELISA쌍사후,분석기아류급진행면역세포화학감정.결과:경ELISA쌍사,획득료일주능은정분비침대정합소α6포외구적단극륭항체적잡교류세포주,기분비항체아류위IgG1.면역세포화학현시차단항재인간암세포계BEL-7402정강양성반응.결론:통과원핵표체산물제비병순화료침대정합소α6포외구적단극륭항체,대분리순화α6아단위、연구기생물학작용급감정정상화질병상태하시부표체정합소α6급기수평구유중요의의.
