中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2001年
2期
95-99
,共5页
单志新%余新炳%马长玲%方建民%李学荣%卞国武%吴忠道
單誌新%餘新炳%馬長玲%方建民%李學榮%卞國武%吳忠道
단지신%여신병%마장령%방건민%리학영%변국무%오충도
疟原虫,恶性%组氨酸富集蛋白Ⅲ%聚合酶链式反应%克隆,分子%序列分析
瘧原蟲,噁性%組氨痠富集蛋白Ⅲ%聚閤酶鏈式反應%剋隆,分子%序列分析
학원충,악성%조안산부집단백Ⅲ%취합매련식반응%극륭,분자%서렬분석
目的克隆并测定恶性疟原虫海南(FCC1/HN)株HRP-I基因序列,比较FCC1/HN株与国外分离株HRP-I基因序列的差异.方法根据HRP-Ⅲ基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增HRP-I基因.通过定向克隆,构建真核表达重组质粒pcDNA3-HRP-I.阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定.应用分子生物学软件进行不同分离株HRP-Ⅲ基因序列的同源性比较.结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株HRP-I基因序列.酶切及PCR鉴定获得了正确的pcDNA3-HRP-Ⅲ重组质粒.测序表明,恶性疟原虫FCC1/HN株HRP-Ⅲ基因全长802 bp,包含一个内含子,编码224个氨基酸.序列分析表明,我国恶性疟原虫FCC1/HN株与国外的Itg2、FC27及IMTM22株HRP-Ⅲ基因序列有较高的同源性.结论成功克隆恶性疟原虫FCC1/HN株HRP-Ⅲ基因.序列测定及同源性分析表明,FCC1/HN株与其它分离株的HRP-Ⅲ基因序列有高度的同源性.
目的剋隆併測定噁性瘧原蟲海南(FCC1/HN)株HRP-I基因序列,比較FCC1/HN株與國外分離株HRP-I基因序列的差異.方法根據HRP-Ⅲ基因已知序列設計閤成一對引物,應用PCR技術從FCC1/HN株基因組DNA中擴增HRP-I基因.通過定嚮剋隆,構建真覈錶達重組質粒pcDNA3-HRP-I.暘性剋隆的重組質粒經酶切及PCR鑒定後,用雙脫氧鏈末耑終止法進行基因序列測定.應用分子生物學軟件進行不同分離株HRP-Ⅲ基因序列的同源性比較.結果 PCR擴增得到特異的FCC1/HN株HRP-I基因序列.酶切及PCR鑒定穫得瞭正確的pcDNA3-HRP-Ⅲ重組質粒.測序錶明,噁性瘧原蟲FCC1/HN株HRP-Ⅲ基因全長802 bp,包含一箇內含子,編碼224箇氨基痠.序列分析錶明,我國噁性瘧原蟲FCC1/HN株與國外的Itg2、FC27及IMTM22株HRP-Ⅲ基因序列有較高的同源性.結論成功剋隆噁性瘧原蟲FCC1/HN株HRP-Ⅲ基因.序列測定及同源性分析錶明,FCC1/HN株與其它分離株的HRP-Ⅲ基因序列有高度的同源性.
목적극륭병측정악성학원충해남(FCC1/HN)주HRP-I기인서렬,비교FCC1/HN주여국외분리주HRP-I기인서렬적차이.방법근거HRP-Ⅲ기인이지서렬설계합성일대인물,응용PCR기술종FCC1/HN주기인조DNA중확증HRP-I기인.통과정향극륭,구건진핵표체중조질립pcDNA3-HRP-I.양성극륭적중조질립경매절급PCR감정후,용쌍탈양련말단종지법진행기인서렬측정.응용분자생물학연건진행불동분리주HRP-Ⅲ기인서렬적동원성비교.결과 PCR확증득도특이적FCC1/HN주HRP-I기인서렬.매절급PCR감정획득료정학적pcDNA3-HRP-Ⅲ중조질립.측서표명,악성학원충FCC1/HN주HRP-Ⅲ기인전장802 bp,포함일개내함자,편마224개안기산.서렬분석표명,아국악성학원충FCC1/HN주여국외적Itg2、FC27급IMTM22주HRP-Ⅲ기인서렬유교고적동원성.결론성공극륭악성학원충FCC1/HN주HRP-Ⅲ기인.서렬측정급동원성분석표명,FCC1/HN주여기타분리주적HRP-Ⅲ기인서렬유고도적동원성.
