微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2001年
3期
329-333
,共5页
陈新华%杨林%洪文洲%陈焕春%陈曲侯%龙綮新%王章
陳新華%楊林%洪文洲%陳煥春%陳麯侯%龍綮新%王章
진신화%양림%홍문주%진환춘%진곡후%룡계신%왕장
伪狂犬病病毒%gD基因%杆状病毒表达系统
偽狂犬病病毒%gD基因%桿狀病毒錶達繫統
위광견병병독%gD기인%간상병독표체계통
克隆了伪狂犬病病毒鄂A株编码包膜糖蛋白gD的基因并进行了序列测定,与国外报道的Rice株相比,其核苷酸序列具有98%的同源性,推导氨基酸序列同源性为97%.将此基因克隆于具有全期启动子盒的杆状病毒转移载体pSX35A中,构建成重组转移质粒pSX35A-gD,与致死缺失型线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV-OCC-)基因组DNA一起共转染粉纹夜蛾Hi5细胞,经同源重组,获得含gD基因的重组病毒AcMNPV-OCC+-gD.重组病毒经空斑纯化后感染Hi5细胞进行表达分析,细胞裂解物的SDS-PAGE及Western-Blotting均显示分子量约47kD的gD蛋白得到了特异性表达,其表达量占细胞总蛋白的6.2%,表达的gD蛋白具有免疫原性.
剋隆瞭偽狂犬病病毒鄂A株編碼包膜糖蛋白gD的基因併進行瞭序列測定,與國外報道的Rice株相比,其覈苷痠序列具有98%的同源性,推導氨基痠序列同源性為97%.將此基因剋隆于具有全期啟動子盒的桿狀病毒轉移載體pSX35A中,構建成重組轉移質粒pSX35A-gD,與緻死缺失型線性化苜蓿丫紋夜蛾覈型多角體病毒(AcMNPV-OCC-)基因組DNA一起共轉染粉紋夜蛾Hi5細胞,經同源重組,穫得含gD基因的重組病毒AcMNPV-OCC+-gD.重組病毒經空斑純化後感染Hi5細胞進行錶達分析,細胞裂解物的SDS-PAGE及Western-Blotting均顯示分子量約47kD的gD蛋白得到瞭特異性錶達,其錶達量佔細胞總蛋白的6.2%,錶達的gD蛋白具有免疫原性.
극륭료위광견병병독악A주편마포막당단백gD적기인병진행료서렬측정,여국외보도적Rice주상비,기핵감산서렬구유98%적동원성,추도안기산서렬동원성위97%.장차기인극륭우구유전기계동자합적간상병독전이재체pSX35A중,구건성중조전이질립pSX35A-gD,여치사결실형선성화목숙아문야아핵형다각체병독(AcMNPV-OCC-)기인조DNA일기공전염분문야아Hi5세포,경동원중조,획득함gD기인적중조병독AcMNPV-OCC+-gD.중조병독경공반순화후감염Hi5세포진행표체분석,세포렬해물적SDS-PAGE급Western-Blotting균현시분자량약47kD적gD단백득도료특이성표체,기표체량점세포총단백적6.2%,표체적gD단백구유면역원성.
