CAJ | 학술논문

为了探讨醛糖还原酶基因5＇调控区存在的可引起蛋白质表达发生改变的遗传变异及这些变异与糖尿病视网膜病变的相关性，应用PCR-SSCP分析对醛糖还原酶基因5＇调控区-609～+40的DNA片段进行了筛选.所有变异体均进行DNA序列分析并克隆至氯霉素乙酰转移酶报告基因载体(pCATreportervector)，然后将重组质粒转染HeLa细胞，通过检测氯霉素乙酰转移酶的活性求出启动子的相对活性.同时进行凝胶滞留试验与足纹分析以确定DNA与核蛋白的相互作用.结果显示，在145名2型糖尿病患者及123名正常对照的醛糖还原酶基因5＇调控区除野生型外，共发现2种多态性[C(-106)T、C(-12)G].在正常对照与患者中，基因型WT/WT，WT/C(-12)G和WT/C(-106)T的发生率无显著性差异.在有视网膜并发症与无视网膜并发症的2型糖尿病患者中，WT/C(-106)T的发生率分别为35.5％和17.9％(χ2=4.00，P＜0.05)，WT/C(-12)G的发生率分别为15.5％和3.3％(χ2=3.43，P＞0.05).在有并发症的患者中，WT/C(-12)G和WT/C(-106)T两者的总发生率为42.3％，显著高于无并发症的患者(20.0％)(χ2=6.23，P＜0.025).野生型，C(-12)G和C(-106)T等3种调控序列的相对活性分别为15.7％，31.0％和32.2％.说明两种多态性与糖尿病视网膜病变显著相关.DNA-蛋白质相互作用试验表明，这些变异并未改变DNA与反式作用因子的结合位点.
위료탐토철당환원매기인5＇조공구존재적가인기단백질표체발생개변적유전변이급저사변이여당뇨병시망막병변적상관성，응용PCR-SSCP분석대철당환원매기인5＇조공구-609～+40적DNA편단진행료사선.소유변이체균진행DNA서렬분석병극륭지록매소을선전이매보고기인재체(pCATreportervector)，연후장중조질립전염HeLa세포，통과검측록매소을선전이매적활성구출계동자적상대활성.동시진행응효체류시험여족문분석이학정DNA여핵단백적상호작용.결과현시，재145명2형당뇨병환자급123명정상대조적철당환원매기인5＇조공구제야생형외，공발현2충다태성[C(-106)T、C(-12)G].재정상대조여환자중，기인형WT/WT，WT/C(-12)G화WT/C(-106)T적발생솔무현저성차이.재유시망막병발증여무시망막병발증적2형당뇨병환자중，WT/C(-106)T적발생솔분별위35.5％화17.9％(χ2=4.00，P＜0.05)，WT/C(-12)G적발생솔분별위15.5％화3.3％(χ2=3.43，P＞0.05).재유병발증적환자중，WT/C(-12)G화WT/C(-106)T량자적총발생솔위42.3％，현저고우무병발증적환자(20.0％)(χ2=6.23，P＜0.025).야생형，C(-12)G화C(-106)T등3충조공서렬적상대활성분별위15.7％，31.0％화32.2％.설명량충다태성여당뇨병시망막병변현저상관.DNA-단백질상호작용시험표명，저사변이병미개변DNA여반식작용인자적결합위점.