中国酿造
中國釀造
중국양조
CHINA BREWING
2003年
1期
12-14,44
,共4页
沈微%王正祥%唐雪明%邵蔚蓝%刘吉泉%诸葛健
瀋微%王正祥%唐雪明%邵蔚藍%劉吉泉%諸葛健
침미%왕정상%당설명%소위람%류길천%제갈건
Pyroccus furiosus 胞外α-淀粉酶分泌表达
Pyroccus furiosus 胞外α-澱粉酶分泌錶達
Pyroccus furiosus 포외α-정분매분비표체
该文将大肠杆菌表达载体pKK223-3中含tac启动子的片段以BamHI、EcoRI酶切后接入表达载体pET28a中,构建成新的表达载体pEtac,通过PCR扩增获得P.furiosus胞外α-淀粉酶完整结构基因,接入pEtac中,转化大肠杆菌JM109.在IPTG诱导下,转化子周质中能测出明显酶活,证明Pyrococcus furiosus的胞外α-淀粉酶能在自身信号肽引导下分泌到大肠杆菌细胞周质中.重组酶最适pH为4.5,最适温度为95℃,重组酶经121℃保温1h,酶活仍能保持50%以上,性质与由P.furiosus自身分泌的胞外α-淀粉酶相似.
該文將大腸桿菌錶達載體pKK223-3中含tac啟動子的片段以BamHI、EcoRI酶切後接入錶達載體pET28a中,構建成新的錶達載體pEtac,通過PCR擴增穫得P.furiosus胞外α-澱粉酶完整結構基因,接入pEtac中,轉化大腸桿菌JM109.在IPTG誘導下,轉化子週質中能測齣明顯酶活,證明Pyrococcus furiosus的胞外α-澱粉酶能在自身信號肽引導下分泌到大腸桿菌細胞週質中.重組酶最適pH為4.5,最適溫度為95℃,重組酶經121℃保溫1h,酶活仍能保持50%以上,性質與由P.furiosus自身分泌的胞外α-澱粉酶相似.
해문장대장간균표체재체pKK223-3중함tac계동자적편단이BamHI、EcoRI매절후접입표체재체pET28a중,구건성신적표체재체pEtac,통과PCR확증획득P.furiosus포외α-정분매완정결구기인,접입pEtac중,전화대장간균JM109.재IPTG유도하,전화자주질중능측출명현매활,증명Pyrococcus furiosus적포외α-정분매능재자신신호태인도하분비도대장간균세포주질중.중조매최괄pH위4.5,최괄온도위95℃,중조매경121℃보온1h,매활잉능보지50%이상,성질여유P.furiosus자신분비적포외α-정분매상사.
