中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2002年
1期
11-16
,共6页
刘源洁%叶林柏%徐进平%郜金荣%冯磊%孙明颢%李江%吴正辉
劉源潔%葉林柏%徐進平%郜金榮%馮磊%孫明顥%李江%吳正輝
류원길%협림백%서진평%고금영%풍뢰%손명호%리강%오정휘
丙型肝炎病毒(HCV)%DNA免疫%免疫组化
丙型肝炎病毒(HCV)%DNA免疫%免疫組化
병형간염병독(HCV)%DNA면역%면역조화
将编码丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白417～750位氨基酸的DNA片段克隆到真核表达载体pcDNA 3.1(-)中的CMVIE启动子下游,构建成HCV E2重组真核表达质粒pcE2.ELISA法检测pcE2 DNA免疫兔血清中的E2抗体变化和维持规律,结果显示免疫20d已有抗体产生,30d后开始进入高峰,40d时达到最高值,至第90d抗体水平保持平稳,抗体滴度达到1:1600左右.流式细胞计数仪(FACS)检测pcE2 DNA免疫鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞变化情况,与注射空载体pCDNA3.1(-)的阴性鼠相比,CD4+淋巴细胞水平略有上升,CD8+细胞水平有较大升高,增幅达35.46%.免疫组化检测结果显示注射pcE2的小鼠组织中有明显的阳性着色,而注射pcDNA3.1(-)的对照组小鼠免疫组化结果为阴性.以上结果表明:pcE2在实验动物内表达出的HCV E2蛋白可以引起免疫动物的体液免疫应答和细胞免疫应答,尤其是MHC-1限制性杀伤性CD8+T淋巴细胞水平的提高对清除病毒是十分有利的,因此HCV E2 DNA免疫有可能成为预防和治疗HCV感染的一条新途径.
將編碼丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白417～750位氨基痠的DNA片段剋隆到真覈錶達載體pcDNA 3.1(-)中的CMVIE啟動子下遊,構建成HCV E2重組真覈錶達質粒pcE2.ELISA法檢測pcE2 DNA免疫兔血清中的E2抗體變化和維持規律,結果顯示免疫20d已有抗體產生,30d後開始進入高峰,40d時達到最高值,至第90d抗體水平保持平穩,抗體滴度達到1:1600左右.流式細胞計數儀(FACS)檢測pcE2 DNA免疫鼠CD4+、CD8+T淋巴細胞變化情況,與註射空載體pCDNA3.1(-)的陰性鼠相比,CD4+淋巴細胞水平略有上升,CD8+細胞水平有較大升高,增幅達35.46%.免疫組化檢測結果顯示註射pcE2的小鼠組織中有明顯的暘性著色,而註射pcDNA3.1(-)的對照組小鼠免疫組化結果為陰性.以上結果錶明:pcE2在實驗動物內錶達齣的HCV E2蛋白可以引起免疫動物的體液免疫應答和細胞免疫應答,尤其是MHC-1限製性殺傷性CD8+T淋巴細胞水平的提高對清除病毒是十分有利的,因此HCV E2 DNA免疫有可能成為預防和治療HCV感染的一條新途徑.
장편마병형간염병독(HCV)E2단백417～750위안기산적DNA편단극륭도진핵표체재체pcDNA 3.1(-)중적CMVIE계동자하유,구건성HCV E2중조진핵표체질립pcE2.ELISA법검측pcE2 DNA면역토혈청중적E2항체변화화유지규률,결과현시면역20d이유항체산생,30d후개시진입고봉,40d시체도최고치,지제90d항체수평보지평은,항체적도체도1:1600좌우.류식세포계수의(FACS)검측pcE2 DNA면역서CD4+、CD8+T림파세포변화정황,여주사공재체pCDNA3.1(-)적음성서상비,CD4+림파세포수평략유상승,CD8+세포수평유교대승고,증폭체35.46%.면역조화검측결과현시주사pcE2적소서조직중유명현적양성착색,이주사pcDNA3.1(-)적대조조소서면역조화결과위음성.이상결과표명:pcE2재실험동물내표체출적HCV E2단백가이인기면역동물적체액면역응답화세포면역응답,우기시MHC-1한제성살상성CD8+T림파세포수평적제고대청제병독시십분유리적,인차HCV E2 DNA면역유가능성위예방화치료HCV감염적일조신도경.
