目的观察糖尿病大鼠模型胃Cajal间质细胞、平滑肌细胞、神经和血管的超微结构改变,为糖尿病性胃轻瘫的发生提供理论依据.方法健康成年雄性SD大鼠50只,体重250～300g,随机分为2组.糖尿病组 :30只;正常对照组:20只.糖尿病组:实验大鼠先稳定3天,然后给予禁食12h(晚8时至早 8时),自由饮水,晨8时大鼠乙醚麻醉后,糖尿病组给予四氧嘧啶45mg/kg经舌下静脉1次注射,饲养4个月,定期测定血糖浓度≥200mg/mL,同时尿糖在以上确定为糖尿病模型.正常对照组:对照组给予等量生理盐水注射.大鼠颈椎脱位后,剖腹迅速剪取胃,沿胃小弯侧剖开胃,在装有Kreb's液的烧杯内仔细去除胃肠内容物,Kreb's液的组成为:120.3NaCl,5 .9KCl,2.5CaCl2,1.2MgCl2,20.2NaHCO3,1.2NaH2PO4,11.5glucose.取胃底、胃体、胃窦组织各1块,并将组织平铺于滤纸上,2.5%戊二醛固定后,0.1mol/L的磷酸缓冲液冲洗,1%的四氧化饿后固定,0.1mol/L的磷酸缓冲液冲洗,乙醇梯度脱水,Epo n 812浸透包埋,半超薄切片1～2μm,染色后光镜下定位,确认粘膜层、粘膜下层、环形肌层和纵行肌层的位置.用瑞典LKB超薄切片机行超薄切片50nm,超薄切片用酒精醋酸双氧铀、再用柠檬酸铅染色,用HITACHI H-600透射电镜观察照相.结果糖尿病大鼠模型胃Cajal间质细胞数量减少.Cajal间质细胞超微结构的变化为:Cajal间质细胞与其它的Cajal间质细胞之间、与平滑肌细胞之间、与神经末梢之间的连接显著减少,尚存的细胞间连接的结构也有破坏、结构不清,连接松散,线粒体肿胀、空泡样变、甚至溶解,细胞内的胞质广泛溶解,有大量的胞质内空泡形成,Cajal间质细胞内的细胞器数量较正常减少,核糖体减少,粗面内质网脱颗粒,核内异染色质明显.糖尿病大鼠模型胃平滑肌细胞排列紊乱,肌细胞内有很多较大的胞质溶解性空泡,线粒体肿胀、空泡样变、溶解.糖尿病大鼠模型胃神经末梢部分肿胀、溶解,肌间丛神经元的细胞核溶解坏死,胞质部分溶解,线粒体肿胀,嵴溶解,粗面内质网扩张,质部分溶解.糖尿病大鼠模型胃毛细血管管壁显著不平,管壁增厚、淤曲,连续性中断,胞质内有小空泡.结论糖尿病大鼠模型胃Cajal间质细胞、平滑肌细胞、神经和血管的超微结构改变,可能是胃肠功能紊乱--胃轻瘫的发生的病理基础.
目的觀察糖尿病大鼠模型胃Cajal間質細胞、平滑肌細胞、神經和血管的超微結構改變,為糖尿病性胃輕癱的髮生提供理論依據.方法健康成年雄性SD大鼠50隻,體重250～300g,隨機分為2組.糖尿病組 :30隻;正常對照組:20隻.糖尿病組:實驗大鼠先穩定3天,然後給予禁食12h(晚8時至早 8時),自由飲水,晨8時大鼠乙醚痳醉後,糖尿病組給予四氧嘧啶45mg/kg經舌下靜脈1次註射,飼養4箇月,定期測定血糖濃度≥200mg/mL,同時尿糖在以上確定為糖尿病模型.正常對照組:對照組給予等量生理鹽水註射.大鼠頸椎脫位後,剖腹迅速剪取胃,沿胃小彎側剖開胃,在裝有Kreb's液的燒杯內仔細去除胃腸內容物,Kreb's液的組成為:120.3NaCl,5 .9KCl,2.5CaCl2,1.2MgCl2,20.2NaHCO3,1.2NaH2PO4,11.5glucose.取胃底、胃體、胃竇組織各1塊,併將組織平鋪于濾紙上,2.5%戊二醛固定後,0.1mol/L的燐痠緩遲液遲洗,1%的四氧化餓後固定,0.1mol/L的燐痠緩遲液遲洗,乙醇梯度脫水,Epo n 812浸透包埋,半超薄切片1～2μm,染色後光鏡下定位,確認粘膜層、粘膜下層、環形肌層和縱行肌層的位置.用瑞典LKB超薄切片機行超薄切片50nm,超薄切片用酒精醋痠雙氧鈾、再用檸檬痠鉛染色,用HITACHI H-600透射電鏡觀察照相.結果糖尿病大鼠模型胃Cajal間質細胞數量減少.Cajal間質細胞超微結構的變化為:Cajal間質細胞與其它的Cajal間質細胞之間、與平滑肌細胞之間、與神經末梢之間的連接顯著減少,尚存的細胞間連接的結構也有破壞、結構不清,連接鬆散,線粒體腫脹、空泡樣變、甚至溶解,細胞內的胞質廣汎溶解,有大量的胞質內空泡形成,Cajal間質細胞內的細胞器數量較正常減少,覈糖體減少,粗麵內質網脫顆粒,覈內異染色質明顯.糖尿病大鼠模型胃平滑肌細胞排列紊亂,肌細胞內有很多較大的胞質溶解性空泡,線粒體腫脹、空泡樣變、溶解.糖尿病大鼠模型胃神經末梢部分腫脹、溶解,肌間叢神經元的細胞覈溶解壞死,胞質部分溶解,線粒體腫脹,嵴溶解,粗麵內質網擴張,質部分溶解.糖尿病大鼠模型胃毛細血管管壁顯著不平,管壁增厚、淤麯,連續性中斷,胞質內有小空泡.結論糖尿病大鼠模型胃Cajal間質細胞、平滑肌細胞、神經和血管的超微結構改變,可能是胃腸功能紊亂--胃輕癱的髮生的病理基礎.
목적관찰당뇨병대서모형위Cajal간질세포、평활기세포、신경화혈관적초미결구개변,위당뇨병성위경탄적발생제공이론의거.방법건강성년웅성SD대서50지,체중250～300g,수궤분위2조.당뇨병조 :30지;정상대조조:20지.당뇨병조:실험대서선은정3천,연후급여금식12h(만8시지조 8시),자유음수,신8시대서을미마취후,당뇨병조급여사양밀정45mg/kg경설하정맥1차주사,사양4개월,정기측정혈당농도≥200mg/mL,동시뇨당재이상학정위당뇨병모형.정상대조조:대조조급여등량생리염수주사.대서경추탈위후,부복신속전취위,연위소만측부개위,재장유Kreb's액적소배내자세거제위장내용물,Kreb's액적조성위:120.3NaCl,5 .9KCl,2.5CaCl2,1.2MgCl2,20.2NaHCO3,1.2NaH2PO4,11.5glucose.취위저、위체、위두조직각1괴,병장조직평포우려지상,2.5%무이철고정후,0.1mol/L적린산완충액충세,1%적사양화아후고정,0.1mol/L적린산완충액충세,을순제도탈수,Epo n 812침투포매,반초박절편1～2μm,염색후광경하정위,학인점막층、점막하층、배형기층화종행기층적위치.용서전LKB초박절편궤행초박절편50nm,초박절편용주정작산쌍양유、재용저몽산연염색,용HITACHI H-600투사전경관찰조상.결과당뇨병대서모형위Cajal간질세포수량감소.Cajal간질세포초미결구적변화위:Cajal간질세포여기타적Cajal간질세포지간、여평활기세포지간、여신경말소지간적련접현저감소,상존적세포간련접적결구야유파배、결구불청,련접송산,선립체종창、공포양변、심지용해,세포내적포질엄범용해,유대량적포질내공포형성,Cajal간질세포내적세포기수량교정상감소,핵당체감소,조면내질망탈과립,핵내이염색질명현.당뇨병대서모형위평활기세포배렬문란,기세포내유흔다교대적포질용해성공포,선립체종창、공포양변、용해.당뇨병대서모형위신경말소부분종창、용해,기간총신경원적세포핵용해배사,포질부분용해,선립체종창,척용해,조면내질망확장,질부분용해.당뇨병대서모형위모세혈관관벽현저불평,관벽증후、어곡,련속성중단,포질내유소공포.결론당뇨병대서모형위Cajal간질세포、평활기세포、신경화혈관적초미결구개변,가능시위장공능문란--위경탄적발생적병리기출.
