环境昆虫学报
環境昆蟲學報
배경곤충학보
JOURNAL OF ENVIRONMENTAL ENTOMOLOGY
2010年
4期
460-468
,共9页
豆威%唐培安%蒋红波%王进军
豆威%唐培安%蔣紅波%王進軍
두위%당배안%장홍파%왕진군
无色书虱%乙酰胆碱酯酶%基因克隆%系统发育
無色書虱%乙酰膽堿酯酶%基因剋隆%繫統髮育
무색서슬%을선담감지매%기인극륭%계통발육
利用RT-PCR结合RACE技术克隆获得了无色书虱Ld acel的3'端序列和Ld ace2的全长序列(GenBank登录号分别为:FJ647186和FJ647187).其中Ld ace2基因全长2111 bp,ORF 1917 bp,编码638个氨基酸组成的前体蛋白,成熟蛋白的分子量为71.9 kDa,理论等电点为4.70,序列比对表明该基因包括AChE家族的所有保守性功能位点;Ld acel基因仅获得了3'端1616 bp的序列,编码500个氨基酸残基,序列比对发现,除缺少形成一对二硫键的半胱氨酸外,Ld acel包含了AChE家族的所有保守性功能位点.结合其它物种AChE构建的分子进化树可以看出,AChE分为4个类群:昆虫I型AChE类群、脊椎动物AChE类群、昆虫Ⅱ型AChE类群和线虫AChE类群,其中无色书虱Ld acel和Ld ace2分别属于昆虫Ⅰ型AChE类群和昆虫Ⅱ型AChE类群,且与嗜卷书虱和嗜虫书虱的AChE具有最近的进化关系.
利用RT-PCR結閤RACE技術剋隆穫得瞭無色書虱Ld acel的3'耑序列和Ld ace2的全長序列(GenBank登錄號分彆為:FJ647186和FJ647187).其中Ld ace2基因全長2111 bp,ORF 1917 bp,編碼638箇氨基痠組成的前體蛋白,成熟蛋白的分子量為71.9 kDa,理論等電點為4.70,序列比對錶明該基因包括AChE傢族的所有保守性功能位點;Ld acel基因僅穫得瞭3'耑1616 bp的序列,編碼500箇氨基痠殘基,序列比對髮現,除缺少形成一對二硫鍵的半胱氨痠外,Ld acel包含瞭AChE傢族的所有保守性功能位點.結閤其它物種AChE構建的分子進化樹可以看齣,AChE分為4箇類群:昆蟲I型AChE類群、脊椎動物AChE類群、昆蟲Ⅱ型AChE類群和線蟲AChE類群,其中無色書虱Ld acel和Ld ace2分彆屬于昆蟲Ⅰ型AChE類群和昆蟲Ⅱ型AChE類群,且與嗜捲書虱和嗜蟲書虱的AChE具有最近的進化關繫.
이용RT-PCR결합RACE기술극륭획득료무색서슬Ld acel적3'단서렬화Ld ace2적전장서렬(GenBank등록호분별위:FJ647186화FJ647187).기중Ld ace2기인전장2111 bp,ORF 1917 bp,편마638개안기산조성적전체단백,성숙단백적분자량위71.9 kDa,이론등전점위4.70,서렬비대표명해기인포괄AChE가족적소유보수성공능위점;Ld acel기인부획득료3'단1616 bp적서렬,편마500개안기산잔기,서렬비대발현,제결소형성일대이류건적반광안산외,Ld acel포함료AChE가족적소유보수성공능위점.결합기타물충AChE구건적분자진화수가이간출,AChE분위4개류군:곤충I형AChE류군、척추동물AChE류군、곤충Ⅱ형AChE류군화선충AChE류군,기중무색서슬Ld acel화Ld ace2분별속우곤충Ⅰ형AChE류군화곤충Ⅱ형AChE류군,차여기권서슬화기충서슬적AChE구유최근적진화관계.
