中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
6期
1604-1608
,共5页
杨阿碰%马洁娴%秦文明%谢彦晖%金由辛
楊阿踫%馬潔嫻%秦文明%謝彥暉%金由辛
양아팽%마길한%진문명%사언휘%금유신
L1210%EGFP%核转染%脂质体转染
L1210%EGFP%覈轉染%脂質體轉染
L1210%EGFP%핵전염%지질체전염
慢性淋巴细胞白血病细胞株L1210是广泛运用于白血病发病机制以及化疗药物研究的细胞模型,但该细胞株与其它悬浮细胞株一样,存在着转染效率低的难题.本研究旨在探讨如何提高L1210细胞株的转染效率.应用报告基因pEGFP并通过AmRxa NucleofectorTM核转染仪的几种转染预设模式转染悬浮L1210细胞,与脂质体Li-pofectamine 2000转染进行对比,在荧光倒置显微镜下观察、使用流式细胞术检测转染效率,用台盼蓝排斥实验比较存活率.结果表明:使用核转染仪进行转染在L1210细胞中获得了很高的转染效率,且在一样细胞密度(2×106/ml)和质粒量(10μg)条件下,在24小时后进行比较,核转染仪预设模式A-20转染效率达(61.6%),明显高于其它模式(S-18、T-20),存活率可达50.5%;脂质体转染24小时细胞存活率为88%,但转染效率极低(<1%).结论:核转染仪转染L1210的效率明显高于脂质体转染方案,其转染效率最高可达61.6%,存活率可达50.5%,此结果可满足科研工作需求.
慢性淋巴細胞白血病細胞株L1210是廣汎運用于白血病髮病機製以及化療藥物研究的細胞模型,但該細胞株與其它懸浮細胞株一樣,存在著轉染效率低的難題.本研究旨在探討如何提高L1210細胞株的轉染效率.應用報告基因pEGFP併通過AmRxa NucleofectorTM覈轉染儀的幾種轉染預設模式轉染懸浮L1210細胞,與脂質體Li-pofectamine 2000轉染進行對比,在熒光倒置顯微鏡下觀察、使用流式細胞術檢測轉染效率,用檯盼藍排斥實驗比較存活率.結果錶明:使用覈轉染儀進行轉染在L1210細胞中穫得瞭很高的轉染效率,且在一樣細胞密度(2×106/ml)和質粒量(10μg)條件下,在24小時後進行比較,覈轉染儀預設模式A-20轉染效率達(61.6%),明顯高于其它模式(S-18、T-20),存活率可達50.5%;脂質體轉染24小時細胞存活率為88%,但轉染效率極低(<1%).結論:覈轉染儀轉染L1210的效率明顯高于脂質體轉染方案,其轉染效率最高可達61.6%,存活率可達50.5%,此結果可滿足科研工作需求.
만성림파세포백혈병세포주L1210시엄범운용우백혈병발병궤제이급화료약물연구적세포모형,단해세포주여기타현부세포주일양,존재착전염효솔저적난제.본연구지재탐토여하제고L1210세포주적전염효솔.응용보고기인pEGFP병통과AmRxa NucleofectorTM핵전염의적궤충전염예설모식전염현부L1210세포,여지질체Li-pofectamine 2000전염진행대비,재형광도치현미경하관찰、사용류식세포술검측전염효솔,용태반람배척실험비교존활솔.결과표명:사용핵전염의진행전염재L1210세포중획득료흔고적전염효솔,차재일양세포밀도(2×106/ml)화질립량(10μg)조건하,재24소시후진행비교,핵전염의예설모식A-20전염효솔체(61.6%),명현고우기타모식(S-18、T-20),존활솔가체50.5%;지질체전염24소시세포존활솔위88%,단전염효솔겁저(<1%).결론:핵전염의전염L1210적효솔명현고우지질체전염방안,기전염효솔최고가체61.6%,존활솔가체50.5%,차결과가만족과연공작수구.