动物学报
動物學報
동물학보
ACTA ZOOLOGICA SINICA
2008年
5期
928-932
,共5页
芦天罡%郭勇%倪和民%刘云海
蘆天罡%郭勇%倪和民%劉雲海
호천강%곽용%예화민%류운해
小鼠%囊胚%双重荧光染色
小鼠%囊胚%雙重熒光染色
소서%낭배%쌍중형광염색
尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法.与传统方法相比,本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1∶5,作用时间为30 min.豚鼠补体最佳稀释度为1∶5,两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3 μg/ml便可着色,染色时间延长至90 min,加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度,并在计数观察前增加压片这一步骤.染色过程中应注意避免血清物质对抗体补体的不良影响以及避光和快速的操作.双重荧光染色后小鼠胚胎内细胞团(ICM)细胞着色为蓝色,滋养层(TE)细胞着色为粉红色,数目清晰可辨.此方法可以作为一种简洁有效的小鼠胚胎质量鉴别参考方法.
嘗試改進併建立一種較可靠的、適閤小鼠胚胎質量參攷鑒定的雙重熒光染色(細胞計數)方法.與傳統方法相比,本實驗中抗羊脾細胞抗血清的最佳稀釋度為1∶5,作用時間為30 min.豚鼠補體最佳稀釋度為1∶5,兩種分染染料H33342和PI的工作濃度均降低至5.3 μg/ml便可著色,染色時間延長至90 min,加大瞭染料工作液中檸檬痠鈉的濃度,併在計數觀察前增加壓片這一步驟.染色過程中應註意避免血清物質對抗體補體的不良影響以及避光和快速的操作.雙重熒光染色後小鼠胚胎內細胞糰(ICM)細胞著色為藍色,滋養層(TE)細胞著色為粉紅色,數目清晰可辨.此方法可以作為一種簡潔有效的小鼠胚胎質量鑒彆參攷方法.
상시개진병건립일충교가고적、괄합소서배태질량삼고감정적쌍중형광염색(세포계수)방법.여전통방법상비,본실험중항양비세포항혈청적최가희석도위1∶5,작용시간위30 min.돈서보체최가희석도위1∶5,량충분염염료H33342화PI적공작농도균강저지5.3 μg/ml편가착색,염색시간연장지90 min,가대료염료공작액중저몽산납적농도,병재계수관찰전증가압편저일보취.염색과정중응주의피면혈청물질대항체보체적불량영향이급피광화쾌속적조작.쌍중형광염색후소서배태내세포단(ICM)세포착색위람색,자양층(TE)세포착색위분홍색,수목청석가변.차방법가이작위일충간길유효적소서배태질량감별삼고방법.
