上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2008年
9期
653-657,插1
,共6页
袁石福%张伟滨%沈宇辉%朱雅萍%王珺%魏立
袁石福%張偉濱%瀋宇輝%硃雅萍%王珺%魏立
원석복%장위빈%침우휘%주아평%왕군%위립
DNA甲基化%表观遗传学%亚硫酸氢盐修饰%基因沉默
DNA甲基化%錶觀遺傳學%亞硫痠氫鹽脩飾%基因沉默
DNA갑기화%표관유전학%아류산경염수식%기인침묵
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)与成骨细胞(OB)在体外传代培养过程中DNA甲基化的差异,并分析BMSCs与OB成骨表型基因甲基化状态与其mRNA表达的相关性.方法 采用甲基化特异性-聚合酶链反应(MSP)方法检测BMSCs、OB基因组DNA中骨钙素(0C),Osterix(OSX)、Runx2等成骨表型和转录基因与抑癌基因p16的甲基化状态,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述成骨表型基因的mRNA表达.同时以茜紊红染色法鉴定OB.结果 OC、OSX、Runx2基因在体外培养的各代BMSCs中呈高甲基化.状态,未检出这些基因的mRNA表达;在OB中,OC、OSX、Runx2基因均呈低甲基化状态,且相应基因mRNA均呈阳性表达.p16在BMSCs和OB中均呈低甲基化状态.BMSCs与OB分别在体外稳定培养5代,各代的成骨表型基因的甲基化状态和mRNA表达量的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 DNA甲基化模式在BMSCs和OB中呈现出细胞特异性差异,且基因甲基化状态可能控制着相应基因的表型表达.在体外稳定培养、传代的条件下,BMSCs和OB均能呈现基因组稳定的特征,未发生明显的DNA甲基化模式的改变,为临床安全应用BMSCs莫定了理论基础.
目的 觀察骨髓間充質榦細胞(BMSCs)與成骨細胞(OB)在體外傳代培養過程中DNA甲基化的差異,併分析BMSCs與OB成骨錶型基因甲基化狀態與其mRNA錶達的相關性.方法 採用甲基化特異性-聚閤酶鏈反應(MSP)方法檢測BMSCs、OB基因組DNA中骨鈣素(0C),Osterix(OSX)、Runx2等成骨錶型和轉錄基因與抑癌基因p16的甲基化狀態,以逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測上述成骨錶型基因的mRNA錶達.同時以茜紊紅染色法鑒定OB.結果 OC、OSX、Runx2基因在體外培養的各代BMSCs中呈高甲基化.狀態,未檢齣這些基因的mRNA錶達;在OB中,OC、OSX、Runx2基因均呈低甲基化狀態,且相應基因mRNA均呈暘性錶達.p16在BMSCs和OB中均呈低甲基化狀態.BMSCs與OB分彆在體外穩定培養5代,各代的成骨錶型基因的甲基化狀態和mRNA錶達量的差異均無統計學意義(P值均＞0.05).結論 DNA甲基化模式在BMSCs和OB中呈現齣細胞特異性差異,且基因甲基化狀態可能控製著相應基因的錶型錶達.在體外穩定培養、傳代的條件下,BMSCs和OB均能呈現基因組穩定的特徵,未髮生明顯的DNA甲基化模式的改變,為臨床安全應用BMSCs莫定瞭理論基礎.
목적 관찰골수간충질간세포(BMSCs)여성골세포(OB)재체외전대배양과정중DNA갑기화적차이,병분석BMSCs여OB성골표형기인갑기화상태여기mRNA표체적상관성.방법 채용갑기화특이성-취합매련반응(MSP)방법검측BMSCs、OB기인조DNA중골개소(0C),Osterix(OSX)、Runx2등성골표형화전록기인여억암기인p16적갑기화상태,이역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측상술성골표형기인적mRNA표체.동시이천문홍염색법감정OB.결과 OC、OSX、Runx2기인재체외배양적각대BMSCs중정고갑기화.상태,미검출저사기인적mRNA표체;재OB중,OC、OSX、Runx2기인균정저갑기화상태,차상응기인mRNA균정양성표체.p16재BMSCs화OB중균정저갑기화상태.BMSCs여OB분별재체외은정배양5대,각대적성골표형기인적갑기화상태화mRNA표체량적차이균무통계학의의(P치균＞0.05).결론 DNA갑기화모식재BMSCs화OB중정현출세포특이성차이,차기인갑기화상태가능공제착상응기인적표형표체.재체외은정배양、전대적조건하,BMSCs화OB균능정현기인조은정적특정,미발생명현적DNA갑기화모식적개변,위림상안전응용BMSCs막정료이론기출.
